05）。 结论： 1、克唑替尼能抑制EML4-ALK阳性肺腺癌细胞株H2228细胞的增殖，同时能诱导H2228细胞的凋亡，呈时间和剂量依赖性。 2、低氧模拟剂氯化钴能下调HIF-1α的mRNA表达，与以往延迟缺氧状态下HIF-1α表达变化一致。 3、克唑替尼能上调H2228细胞HIF-1α、Akt的mRNA表达，下调VEGF的表达。在低氧状态下克唑替尼上调HIF-1αmRNA的作用更明显（P＜0.05）。 4、HIF-1αmRNA的上调在克唑替尼诱导H2228细胞株凋亡过程中发挥重要作用，是关健转录活性分子。
目的：探讨以磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶蛋白家族成员雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin，mTOR）为中心的信号通路，在克唑替尼（Crizotinib）诱导的EML4-ALK （Echinoderm microtubule-associatedprotein-like4，棘皮动物微管结合蛋白4，Anaplastic lymphoma kinase，间变性淋巴瘤激酶)融合基因阳性的非小细胞肺癌细胞株H2228凋亡中的作用。方法：根据不同的实验目的处理H2228细胞后，采用荧光定量PCR检测基因状态，噻唑蓝(MTT)法检测细胞抑制率；采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期；采用Western

blotting检测细胞mTOR信号通路中的关键蛋白表达及活化水平。

结果：crizotinib对H2228细胞有促凋亡作用，且呈时间和剂量依赖性，且能使H2228细胞阻滞在G1期。在使用crizotinib处理的凋亡细胞株中发现mTOR活化水平降低，mTOR的上下游关键蛋白活化水平都呈下降趋势，肺癌细胞株H2228中的特殊表达的融合蛋白EML4-ALK 可能 V3表达量未受影响，但其活化形式p-ALK明显受到抑制。结论：初步证实mTOR信号通路在crizotinib诱导含有EML4-ALK融合基因的肺癌细胞H2228凋亡中有一定关系，为crizotinib的作用机制提供了一个依据。
背景：在世界范围内，肺癌位居所有癌症中发病率和死亡率的首位。其中大多数为非小细胞肺癌（non-small 已经 cell lung cancer，NSCLC）。目前，分子靶向治疗是NSCLC的治疗中最有发展前景的部分。近年来，非小细胞肺癌新的分子生物靶点例如棘皮动物微管相关类蛋白4与间变性淋巴瘤激酶融合基因（echinodermmicrotubule-associated protein-like4，EML4；anaplastic lymphoma kinase，ALK；EML4-ALK fusion gene）越来越受到关注。 目的：本研究的目的是通过文献复习对EML4-ALK融合基因的基本结构、临床病理学特征、检测方法、ALK抑制剂及其在非小细胞肺癌治疗中的意义作一综述。方法：1.应用检索CNKI、万方全文数据库、Pubmed、Springerlink数据库检索系统，以“非小细胞肺癌；EML4-ALK融合基因；分子靶向治疗”为关键词，分别或联合检索2007-01—2012-12的相关文献150篇。2.纳入标准：1)基本结构；2）临床病理学特征；3）检测方法；4)ALK抑制剂；5)分子靶向治疗。根据纳入标准，精选50篇文献，最后纳入分析41篇文献。

www.selleckchem.cn/products/icg-001.html 结果：EML4-ALK融合基因是NSCLC新一类的亚型。EML4-ALK融合基因的形成是由2号染色体短臂插入引起的，它至少有11种亚型。NSCLC中EML4-ALK融合基因阳性更常见年轻男性患者，轻度吸烟∕不吸烟，腺癌，K-ras、EGFR野生型。常用来检测EML4-ALK的方法有IHC、RT-PCR、FISH和RACE-偶联PCR测序，各方法有其优缺点，有一定的互补性。ALK抑制剂PF-02341066(Crizotinib)治疗EML4-ALK阳性的NSCLC能取得较佳的疗效，有望成为晚期NSCLC患者的标准治疗。 结论：EML4-ALK融合基因是非小细胞肺癌中关键而又独立的分子靶点，对其结构、临床病理联系、ALK抑制剂及其耐药机制的的进一步研究，可以为非小细胞肺癌患者提供更多的治疗选择。
目的：了解ALK抑制剂克唑替尼(Crizotinib)及TAE684(NVP-TAE684)对EML4-ALK融合基因阳性人肺癌细胞株H2228增殖和凋亡的影响,为临床用药提供依据。 材料和方法：从广东省人民医院肺癌研究所获得EML4-ALK融合基因阳性人非小细胞肺癌细胞株H2228并按常规培养至对数生长期。查阅文献,了解克唑替尼及TAE684在既往实验中的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)值,设置MTT法中药物的浓度梯度,采用MTT法分别分析克唑替尼和TAE684处理72h后H2228细胞的生长增殖情况。采用流式细胞技术分析克唑替尼处理24、48、72h后H2228细胞凋亡的情况。采用SPSS19.0统计软件进行单因素ANOVA分析,计算细胞生长抑制率,p0.05)。TAE684不能抑制H2228细胞的增殖。 结论：克唑替尼对EML4-ALK阳性细胞株H2228有明显抑制作用,且抑制作用随药物浓度增加而增加。克唑替尼对H2228细胞的半抑制浓度IC50为334.