蛋白质印迹法实验结果显示，在完全相同的培养条件和实验条件下，上述三种细胞内的细胞周期蛋白D1及其依赖性激酶CDK4的水平存在差异，但是无法解释细胞对药物敏感性的差别。初步验证了我们的假设，即细胞周期蛋白D1本身或是结合其相应的激酶CDK4调节乳腺癌细胞对化疗药物的敏感性。 二.利用真核细胞表达外源蛋白的反转录病毒系统为工具，在MCF7和MB那个231细胞中构建了稳定表达外源细胞周期蛋白D1的克隆并对其对化疗药物的敏感性进行了系统的检测，得到如下结果： 1.在对MCF7细胞克隆的研究中得到如下结果： 构建了稳定表达野生态及定点突变的外源细胞周期蛋白D1的细胞克隆（D1和D1KE）及相应的空载体对照克隆，RT-PCR和蛋白质印迹法实验结果证实了外源蛋白的表达而且。 1) MTT实验，AO/EB双染色法及平板细胞集落形成实验的结果均证实，MCF7细胞D1克隆对于CDK4激酶抑制剂NPCD，顺铂（CDDP）和吉西他滨(Gemzar)三种药物的敏感性强于D1KE克隆和空载体克隆。而且D1和D1KE克隆在药物作用终止后，恢复生长繁殖的能力低于空载体克隆。由此，在MCF7乳腺癌细胞R428中表达外源D1蛋白增强了细胞对抗肿瘤药物的敏感性，在某种程度上， D1的作用需要CDK4激酶的活性的协调，但是对CDK4激酶的依赖性和依赖程度与抗肿瘤药物的作用特点相关。 2)通过对三种克隆细胞周期的分析显示，在无血清或5%FBS培养条件下，三种克隆之间细胞周期的分布无显著差异。由此证实，三种克隆之间对药物敏感性的差异并不是由于加速的细胞生长而引起的，而外源表达的D1没有引起细胞的加速繁殖。