5 TIPE2对细胞凋亡的影响采用PI-AnnexinV双染的方法应用流式细胞仪检测细胞凋亡,并利用Western bolt的方法

5.TIPE2对细胞凋亡的影响采用PI-AnnexinV双染的方法应用流式细胞仪检测细胞凋亡,并利用Western bolt的方法检测凋亡相关蛋白的表达,探讨TIPE2促进细胞凋亡的机制。6.TIPE2对炎症相关因子的影响采用双报告基因检测TIPE2对LPS诱导的NF-κB活化的影响;通过ELISA检测相关炎症因子的表达。7.TIPE2对LPS诱selleck compound导的细胞增殖的影响在TIPE2干扰稳定细胞株中检测LPS诱导后对细胞增殖的影响。研究结果1.对胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织样本进行RT-PCR及免疫组织化学法检测TIPE2的表达,结果显示,TIPE2在胃癌组织中的表达明显低于癌旁正常胃粘膜组织。2.建立了 TIPE2过表达的胃癌稳定细胞系,慢病毒介导的TIPE2过表达能GSK461364抑制胃癌细胞的增殖,并上调p-AKT和p-ERK1/2的表达。3.TIPE2过表达使细胞周期阻滞在G2/M期,下调CDK1和CyclinB1的表达水平,并上调p-CDK1蛋白的表达。4.TIPE2过表达后,能够明显抑制胃癌细胞的迁移,上调E-cadherin的表达,下调N-cadherin和Vimentin的表达。5.TSelleckchem 17-AAGIPE2过表达后能促进胃癌细胞的凋亡,抑制Bcl-2的表达,上调caspase-9和Caspase-3的活性切割蛋白的表达。6.LPS能反馈性地上调TIPE2的表达,而TIPE2能够抑制LPS诱导的NF-κB的活化,并抑制LPS诱导的炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的表达。7.TIPE2干扰促进LPS诱导的细胞增殖。结论1.TIPE2在胃癌组组织中的表达量降低或缺失,可能与胃癌的发生发展有关。

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