3.分离纯化小鼠腹腔巨噬细胞,分别用不同浓度Hcy处理腔巨噬细胞24 h,或者在相同Hcy浓度的条件下,处理细胞不同时间(12 h,24 h,48 h),筛选Hcy促进巨噬细胞凋亡的适当浓度及时间点。用4-PBA抑制内质网应激流式细胞学检测能否逆转Hcy促巨噬细胞凋亡的作用。通过流式细胞学及蛋白免疫印迹法检测Hcy对巨噬细胞内质网应激分子通路及ERselleck compoundO1α表达的作用。4.用尾静脉注射携带靶向ERO1α的sh RNA慢病毒或过表达慢病毒的方法调控Apo E~(-/-)小鼠体内ERO1α表达水平,检测在Hcy存在条件下,改变ERO1α表达水平对Apo E~(-/-)小鼠AS斑块进展及稳定性的作用,以及斑块内巨噬细胞凋亡及内质网应激水平的影响。5.通过慢病毒转染的方法调控小selleck鼠腹腔巨噬细胞内ERO1α表达水平,检测在Hcy刺激下,改变ERO1α表达水平对体外巨噬细胞凋亡及内质网应激相关信号通路的影响。结果1.高Hcy饮食能够升高小鼠血浆Hcy水平,且达到HHcy诊断标准。HHcy组斑块损伤面积及斑块易损指数等评价斑块进展的指标较对照组升高。2.HHcy组斑块内巨噬细胞凋亡率及内质网应激标志物阳Nepicastat核磁性面积高于对照组。3.Hcy促进小鼠腹腔巨噬细胞凋亡,ERO1α及内质网应激相关分子的表达,且呈剂量及时间依赖性,筛选200μM浓度Hcy干预24 h为后续试验干预条件。4-PBA抑制内质网应激能逆转Hcy促巨噬细胞凋亡的作用。4.敲除Apo E~(-/-)小鼠体内ERO1α,HHcy组Apo E~(-/-)小鼠AS斑块损伤面积及易损指数降低,过表达Apo E~(-/-)小鼠体内ERO1α上述指标升高。