6)通过经典的连续稀释实验(serial dilution assay)用不同数量的肝癌细胞在NOD/SCID小鼠身上进行荷瘤实验,以明确干扰TRα后,是否影响肝癌细胞中LCSCs的比例及肝癌细胞在体内的增殖。7)利用Realtime-qPCR、染色质免疫共沉淀(ChIP)等手段继续探索了TH/TRα信号通路促进肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)自我更新Tanespimycin molecular weight的分子机制。[结果]在研究中,我们发现TH/TRα信号通路可以显著地促进肝癌细胞的自我更新。通过进一步的检测,发现TH/TRα信号通路也可以增加CD90~+肝癌细胞的数量并促进肝癌细胞对化疗药物的耐受性,TH主要通过其受体TRα发挥作用。此外,我们的功能研究发现,利用特异针对TRα的shRNA干扰其表达,可以显著抑制TH/TRα信号通路对肝癌细胞体外自我更新、Cselleck产品D90~+肝癌细胞群数量、药物耐受性以及体内成瘤生长的诱导作用。我们进一步通过分析临床肝细胞癌组织样本,发现与正常肝脏组织相比,TRα的mRNA在门静脉癌栓(portal vein tumor thrombus,PVTT)和HCC组织中的表达显著升高。而进一步的机制研究发现,敲除TRα不但可以抑制肿瘤细胞在体外的自我更新,而且可以抑制肝癌细胞在体内的生长。非常有确认细节趣的是,我们还发现在肝癌细胞中TH/TRα信号通路与NF-κB信号转导通路具有协同作用TRα通过与NF-κB亚基p65的相互作用,共同结合癌基因BMI1的启动子区并促进了BMI1的表达;而且,NF-κB信号转导通路在TH诱导肝癌细胞自我更新的过程中是发挥作用的。[结论]我们的研究表明TH/TRα信号通路在LCSCs的调控中具有重要的作用,可以特异性增加CD90~+肝癌细胞群的比例并促进肝癌细胞的自我更新,进而导致肝癌细胞对化疗药物的耐受性增加。