Ray Biotech Human Cytokine Array示差异性表达细胞因子23个,其中胰腺癌患者血浆中高表达11个、低表达12个,在高表达的细胞因子中,IL-18差异最明显;胰腺癌组织基因芯片数据分析显示IL-18在胰腺癌与免疫系统的相互作用中可能发挥重要作用。 2.IL-18在胰腺癌患者血浆中的表达量相对胰腺良性肿瘤、十二指肠肿瘤、胆管癌、肝癌、胰腺炎患者高表达；在胰腺癌患者中,手术前3天IL-18的表达量要比手术后3天的高(p<0.01)；IL-18的表达量与胰腺癌生存期呈正相关(p<0.001),且IL-18的表达量与是否发生侵袭转移(p<0.05)和AJCC临床分期密切相关；IL-18在胰腺癌组织中的表达量与生存期呈负相关(p<0.05),显著增加Tc细胞(p<0.001)和NK细胞(p<0.05)和NK细胞(p
原小檗碱类生物碱包括小檗碱、黄连碱、药根碱、氯化两面针碱、小檗红碱等,药理作用广泛,临床常用于抗菌、消炎、镇痛、降糖等。小檗碱、药根碱、黄连碱等活性成分可由多年生草本植物黄连、三角叶黄连等植物根茎提取,氯化两面针碱(Nitidine selleck screening library Chloride, NC)是从药用植物两面针Zanthoxylum nitidine (Roxb)
DC根中分离得到的生物碱。现代研究证明,NC具有抗肿瘤、抗炎镇痛等药理作用,尤其在抗肿瘤方面,由于其抗瘤谱广,对肺癌、口腔鳞癌、肝癌等许多恶性肿瘤具有较强的抑制作用,具有潜在的开发价值和应用前景。有机阳离子转运体(organic
selleck化学 cation transporters, OCTs),包括OCT1,OCT2和OCT3,在体内主要负责转运小分子有机阳离子或中性化合物,包括内源性化合物和一些外源性底物。人肝脏表达OCT1,OCT3,而肾脏则表达OCT2。原小檗碱类生物碱为含氮的叔氨或季氨生物碱,在生理pH7.4的条件下以阳离子或中性化合物的形式存在,因此,推测肝细胞膜上的OCTl及OCT3,肾细胞膜上表达的OCT2可能介导这类生物碱在肝、肾细胞的摄取。为深入了解OCTl,OCT2和OCT3在这类生物碱肝、肾细胞处置中的作用,并考察由此引起的体内外毒性,本研究首先考察该类生物碱与OCT1/OCT2的相互作用,进而选择氯化两面针碱(NC),采用多种转基因细胞模型、人肝脏微粒体、人重组CYP酶及整体动物模型,研究由转运体OCTs介导的NC跨膜转运、肝细胞中CYP450介导的代谢、药代动力学特征及其体内外毒性,进一步阐明细胞膜药物转运体、药物代谢酶等在NC体内外毒性中的作用,并进行体内外毒性的相关性分析,为NC的进一步研发提供参考。第一章有机阳离子转运体1,2与原小檗碱类及类似生物碱相互作用研究背景和目的：原小檗碱类生物碱为叔胺或季铵化合物,在生理pH 7.4条件下以阳离子或中性化合物存在。肝脏、肾脏细胞基底膜上的有机阳离子转运体1和2(OCT1和OCT2)主要负责转运小分子有机阳离子及中性化合物。基于原小檗碱类生物碱的化学结构,及OCT1/OCT2的肝肾分布,本章主要研究原小檗碱类及类似物生物碱与OCT1/OCT2的相互作用。方法：应用稳定高表达人有机阳离子转运体1或2(hOCT1,
hOCT2)和空载体(mock)细胞(MDCK-hOCT1, 可能 MDCK-hOCT2和MDCK-mock)模型,采用细胞积聚方法,阐明原小檗碱类及类似生物碱,包括小檗碱、黄连碱、药根碱、表小檗碱、小檗红碱、氯化两面针碱、巴马汀、延胡素甲素、(-)-延胡素乙素((-)-THP)对OCT1/2经典底物的抑制作用,进一步考察其在稳定转染hOCT1, hOCT2细胞上的积聚与mock细胞上积聚的差异,以阐明其是否为OCTs底物。此外,为阐明OCTs基因多态性对该类生物碱摄取的影响,本研究选择小檗碱和黄连碱,考察其在MDCK-OCT1-P341L和MDCK-OCT2-A270S细胞上积聚与表达野生型OCT细胞上积聚的差异。结果：本研究考察的生物碱均能显著抑制MPP+在MDCK-hOCT1/ MDCK-hOCT2细胞上的摄取,且抑制作用不亚于阳性抑制剂(OCT1：奎尼丁；OCT2：西咪替丁)。细胞摄取研究表明,小檗碱、黄连碱、药根碱、表小檗碱、氯化两面针碱及小檗红碱在MDCK-hOCT1/MDCK-hOCT2细胞中的积聚明显高于mock细胞,细胞摄取动力学研究显示,在MDCK-hOCT1细胞上,上述生物碱Km大小顺序为：黄连碱>药根碱>表小檗碱>小檗碱>小檗红碱>氯化两面针碱,Vmax依次为：黄连碱>表小檗碱>药根碱>氯化两面针碱>小檗红碱>小檗碱,Clint依次为：氯化两面针碱>小檗红碱>黄连碱>表小檗碱>小檗碱>药根碱；而在MDCK-hOCT2细胞上,上述生物碱的Km为：小檗红碱>表小檗碱>小檗碱>氯化两面针碱>黄连碱>药根碱,Vmax为：氯化两面针碱>黄连碱>小檗红碱>小檗碱>表小檗碱>药根碱,Clint依次为：氯化两面针碱>黄连碱>小檗碱>药根碱>小檗红碱>表小檗碱。表达OCT1-P341L和OCT2-A270S等位突变基因细胞对小檗碱和黄连碱的亲和力(Km减小)增加至野生型细胞的1.8-11.8倍,内在清除率(Clint)为野生型细胞的1.3-3.