(4)采用ELISA法检测血清中PAR2/TRPV1通路的主要炎性介质胰蛋白酶(trypsin)、TNF-α、IL-1β的表达水平,采用RT-PCR和Western blot法检测骨癌痛大鼠体内DRG神经元上PAR2/TRPV1通路相关分子PAR2、TRPV1、PKC-γ和PKA的mRNA和蛋白表达水平以及脊髓中神经递质c-Fos、GFAP、IBA1及CTrichostatin A体内GRP mRNA和蛋白表达水平。结果：(1)消癥止痛外用方24小时的累计经皮渗透率和速率分别为20.20%,0.7441μg·cm-2·h-1。说明消癥止痛外用方凝胶膏剂对大鼠皮肤的渗透作用行为符合零级动物学模型且离散度较小,经皮渗透作用较为理想,为以后消癥止痛外用方的作用机制研究提供了可靠的药物制剂。(2)安慰剂组骨癌痛大鼠机Selleckchem BI 10773械痛阈值和PWL逐渐下降,最低评分分别为1.83±0.15和4.57±0.28,而高、中、低剂量消癥止痛外用方组均较安慰剂组明显提高机械痛阈值和PWL,二者有统计学差异(P<0.05)。安慰剂组X线、Mirco-CT以及BMC和BMD测量结果显示骨组织破坏明显,伴全厚度双皮质骨损失,高、中、低剂量消癥止痛外用方组能明显降低骨癌痛buy Autophagy Compound Library大鼠骨质破坏,提高骨密度(P<0.05)。各组骨组织病理显示：消癥止痛外用方可减少骨组织中肿瘤细胞的侵袭。(3)与安慰剂组相比,消癥止痛外用方组能显著降低骨癌痛大鼠模型血清CTX、TRAP5b以及osteocalcin (p<0.05),亦能显著降低TRAP阳性细胞比例(p<0.05)和BAP阳性细胞比例(p<0.05),而且消癥止痛外用方能显著降低骨癌痛模型大鼠局部骨组织巨噬细胞的阳性比例(p<0.05)。