31±16.25和401.48±35.59),且8001μM组引起的释放量大于400μM组。

4、IL-p的检测结果显示,P物质200μM组在4个时间点与空白对照组相比,均无统计学差异。P物质400μM组和800μM组从6h开始,IL-p释放量明显增加(212.64±15.01和414.69±20.74),12h达到高峰(分别为285.04±20.74和642.6±11.62),24h浓度有所降低(分别为223.97±4.73和367.33±13.42),与TNF-a的释放量类似,800μM组引起的释放量大于400μM组。 5、胞内钙离子成像测定结果显示,P物质200μM或400μM孵育后均未能改变胞浆内Ca2+浓度。当P物质浓度达到800μM时,胞浆内Ca2+迅速降低,镜下观察发现部分细胞失去贴壁能力。 6、P物质400μM孵育脊髓小胶质细胞15min后,胞内p38MAPK磷酸化水平明显升高。 7、P物质400μM孵育12h预先活化的小胶质细胞注入成年SD大鼠脊髓蛛网膜下腔后,动物PWL减小,出现热痛觉敏感,并可持续至注射后24h。结论： MK 1775 1、P物质可以诱导脊髓小胶质细胞活化,其有效浓度为400μM,至少需持续作用6h。 2、P物质可以诱导小胶质细胞p38MAPK的磷酸化,但未能升高小胶质细胞胞内钙离子浓度。

3、P物质活化的脊髓小胶质细胞参与热痛觉敏感的形成。 4、 P物质诱导脊髓小胶质细胞活化参与热痛觉敏感的形成可能与p38MAPK信号通路活化,并使细胞释放促炎因子TNF-α、IL-1β有关。
目的：应用5’-磷酸腺苷(5′-AMP)诱导低温作用于LPS诱导的大鼠炎症动物模型,分析ERK1/2、JNK、p38和NF-κB四条信号通路,明确5’-磷酸腺苷(5′-AMP)诱导低温抗炎的可能机制。 方法：将成年健康的Wistar随机分为四组：空白对照组、LPS阳性对照组、5′-AMP低温预防治疗组、5′-AMP低温治疗组。每组12只大鼠。每组大鼠在注射LPS6h和12h后眼静脉丛取血保存,在LPS注射12h后取肺组织,分别冻存和福尔马林固定。ELISA法测定血清中CD14、CRP和MCP-1的表达水平,免疫组化法观察TLR4在肺组织中的表达情况,Western Selleckchem PLX4032 Blot技术测定ERKl/2、JNK、p38和NF-κB四条信号通路总蛋白和磷酸化蛋白的水平。 将36只Wistar大鼠随机分为三组：LPS炎症组、5′-AMP低温预防治疗组、5′-AMP低温治疗组,每组12只大鼠,进行生存分析,记录每组12h内大鼠的生存率,重复三次。 结果：实验结果表明,与LPS组相比,无论是5′-AMP低温预防组还是5′-AMP低温治疗组,都能显著地降低血清中CD14和CRP的表达水平。免疫组化结果显示,肺组织中TLR4的表达量LPS组显著高于5′-AMP低温干预组。Western

Blot结果显示,5′-AMP诱导的低温能够抑制炎症信号通路ERK1/2、JNK、p38和NF-κB的激活。另外,5′-AMP低温治疗组和5′-AMP低温预防组大鼠的生存率和生存时间显著高于LPS炎症组,且5′-AMP低温预防组的效果优于5′-AMP低温治疗组。 结论：5′-AMP诱导的低温能够通过降低炎症因子表达水平及抑制炎症信号通路ERKl/2, p38, JNK和NF-κB的激活而发挥抗炎作用,保护炎症模型动物组织器官免受损伤。
目的通过观察不同时间段肺组织中小窝蛋白-1(caveolin-1, Autophagy Compound Library购买 cav-1)、p-P38MAPK和IL-8的表达水平,探讨cav-1在机械通气所致肺损伤(VILI)发生中的作用。方法雄性Wistar大鼠24只,随机分为3组：对照组、大潮气量通气半小时组(H-VT0.5h组)和大潮气量通气2小时组(H-VT2h组)。在光镜下观察各组大鼠肺组织病理学改变,测定BALF总蛋白含量和肺湿/干重比值(W/D),采用免疫组织化学染色法测定肺组织cav-1、p-P38MAPK和IL-8的蛋白表达水平,并进行相关性分析。 结果 1.肺组织cav-1表达结果：H-VT0.5h组(0.142±0.014)和H-VT2h组(0.267+0.017)cav-1蛋白表达均明显高于对照组(0.118±0.010)(均P<0.01),H-VT2h组cav-1蛋白表达明显高于H-VT0.5h组(P0.05)。 3.肺组织P-P38MAPK表达结果：H-VT2h组(0.514±0.031)p-P38MAPK蛋白表达明显高于对照组(0.148±0.016)和H-VT0.5h组(0.166+0.010)(均P0.05)。 4.肺组织cav-1、p-P38MAPK、IL-8相关性分析结果：各组大鼠肺组织中cav-1蛋白表达与p-P38MAPK之间呈正相关(r=0.787,P0.05)。 6.BALF总蛋白含量测定结果：H-VT2h组(0.620±0.140)BALF中总蛋白含量明显高于对照组(0.220±0.063)和H-VT0.5h组(0.300±0.140)(均P0.05)。 7.肺组织病理学结果：随着机械通气时间延长,大鼠肺组织损伤程度呈逐渐加重趋势。结论 1.大潮气量机械通气诱导了cav-1的表达,早期(0.5h内)以保护作用为主,后期(2h后)以损伤作用为主。 2.