05。(3)GCSsiRNA转染K562∕A02细胞24小时后,以Mock组为对照、GAPDH基因为内标,实验组GCS mRNA表达水平明显受抑制,抑制率为69%(58～78% ), P 0.05。与GCSsiRNA转染K562/A02细胞24小时比较,转染48小时后MDR1mRNA表达下调65%(54～74%),P 也许 0.05。(4)与K562/A02细胞空白组比较,转染72小时后GCSsiRNA组和MDR1siRNA组细胞P-gp表达的相对吸光度值分别下调1.44倍和3.54倍, P
目的探讨IL-29和IL-10单独和联合脂多糖刺激Hela细胞后IL-15和IL-6转录水平的变化,分析其激活的信号转导通路。
方法培养的Hela细胞,经不同浓度的LPS及IL-10(IL-29)单独或联合处理后,提取细胞总RNA和总蛋白,RT-PCR分析IL-15和IL-6转录水平的变化,Western blot分析信号转导通路蛋白变化。 结果1. RT-PCR分析显示: ①1 ng～10μg LPS刺激Hela细胞12 h后,IL-15mRNA和IL-6mRNA水平均明显上调(与对照组比较:P0.05)。不同浓度的IL-10(1,10,100 ng/mL)均下调100 ng/mL LPS诱导的Hela细胞IL-15mRNA和IL-6mRNA的表达,且浓度越高IL-10抑制作用越明显。 ③单独IL-29(100ng/ml)作用能显著降低Hela细胞IL-15和IL-6转录水平。IL-29和LPS联合作用Hela细胞后,IL-29亦能显著抑制LPS诱导的IL-15和IL-6转录,并且在一定浓度范围内(80～240ng/ml)存在剂量依赖性(与LPS组比较,P0.05)。
结论IL-10和IL-29均能抑制LPS诱导的炎症细胞因子IL-15和IL-6的转录,且发现IL-10下调作用可能与其能阻断AKT的激活有关。因而,我们推测IL-29可能具有类似IL-10的抗炎作用,为某些临床感染性疾病的预防和治疗带来新的希望。
为了研究氧化应激影响肉仔鸡肉品质的主要MAPK信号转导通路,论文分为肉仔鸡胸肌骨骼肌卫星细胞氧化应激模型优化,氧化应激状态下起主要作用的MAPK信号通路的筛选,抗氧化物质对信号通路的作用及维生素C和茶多酚对慢性应激条件下肉仔鸡生产性能的影响及其MAPK通路四个部分,采用细胞模型和动物应激试验相结合的方法,研究了氧化应激时MAPK信号通路的改变对鸡肉品质的影响机理。现分别摘要如下: 试验一肉仔鸡胸肌卫星细胞氧化应激模型的优化 AUY-922研究购买 【目的】以地塞米松(DEX)处理肉仔鸡胸肌卫星细胞(SCs),筛选DEX的最佳作用时间和浓度,以优化肉仔鸡卫星细胞的氧化应激模型。【方法】将体外培养的肉仔鸡胸肌SCs按DEX处理浓度(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48和0.96 mg/ml)分为7组,分别测定培养不同时间(6 h、12 h、24 h和48 h)点SCs的存活率(MTT法),细胞及培养液丙二醛(MDA)、氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转酶(GST)含量或活性。【结果】随DEX浓度升高,SCs中MDA和ROS含量极显著升高(P<0.01)、SOD和GST活性极显著降低(P0.05)。单独抑制剂处理组SCs中SOD和GST活性均显著高于DEX处理组(P0.05)。DEX能抑制SOD和GST基因的表达,抑制率高于37%;与抑制ERK5和ERK1/2通路不同,抑制p38MAPK和JNK通路后,DEX对SOD和GST基因的表达无明显抑制作用。【结论】研究揭示,在DEX诱导肉仔鸡胸肌SCs产生氧化应激过程中,p38MAPK和JNK通路起着关键作用。
Selleck FHPI 试验三氧化应激条件下抗氧化物质对p38MAPK和JNK通路的调节作用 【目的】探讨肉仔鸡胸肌SCs氧化应激时,抗氧化物质(维生素C(VC)、维生素E(VE)、茶多酚(TP)、大豆黄酮(DZ)和吡咯喹啉醌(PQQ))对p38及JNK信号通路的作用。【方法】将培养的肉仔鸡胸肌SCs分为12个处理(对照、DEX、p38抑制剂、p38抑制剂+ DEX、JNK抑制剂、JNK抑制剂+ DEX、VC + VE + DEX、VC + DEX、VE + DEX、TP+DEX、DZ + DEX和PQQ + DEX),分别测定SCs培养基中MDA、ROS、SOD和GST含量或活性,并检测MEK3和MEK4基因表达及抗氧化酶基因表达。【结果】与DEX处理相比,所有抗氧化物质处理均显著降低了SCs中MDA与ROS的产量(P<0.05),其中VC和TP处理组极显著地降低了MDA和ROS的产生量(P<0.01);抗氧化物质处理组SOD和GST活性极显著地高于DEX处理组(P0.05);28～42 d。与对照组相比,VC+DEX、TP+DEX组,以及DEX处理组,肉仔鸡日采食量和日增重均未受到影响(P>0.05);应激处理组(添加DEX)肉仔鸡的生产性能极显著低于非应激组(未添加DEX)(P<0.01),MDA产生量显著低于DEX组(P0.05);TP与VC下调了MEK3和MEK4表达量,上调了SOD和GST的表达量;42d,VC和TP处理组肉仔鸡胸肌SOD和GST活性显著高于DEX处理组(P0.05);VC+DEX和TP+DEX组SOD和GST活性均高于DEX组,但差异不显著(P>0.