The results of targeted therapy trials have by and large been disappointing,but none

of these trials looked at an appropriately enriched population.Finally there is a meager overall survival benefit in treating patients with metastatic disease in the second line setting,with either irinotecan,docetaxel or ramucirumab however none of these drugs have been compared head to head in a well-powered randomized controlled trial.
目的:建立荧光原位杂交方法(fluorescent in situ hybridization,FISH)检测ROS1基因重排,评价检测试剂在临床样本中的检测情况。方法:依据ROS1断裂重排方式,设计、制备双色荧光探针。以人外周血培养细胞为检测对象评价ROS1基因重排检测探针的灵敏度和特异性,建立阴性阈值。以NSCLC患者的肿瘤组织样本为对象进行ROS1重排检测及性能评价。结果:建立的FISH方法在人外周血培养细胞检测中特异性和灵敏度均达到100%,在对192例临床样本制备的高密度组织芯片的检测中,筛查出1例ROS1 FISH阳性样本。结论:本研究制备的双色荧光探针可用于ROS1基因重排检测。通过ROS1重排检测,将有助于临床方案制定,辅助个体化治疗。
目的探讨分子生学标记物与重组人血管内皮抑制素靶向治疗非小细胞肺癌(non-small-cell selleck化学 lung cancer,NSCLC)疗效之间的关系。方法选择符合要求的非小细胞肺癌患者68例,随机均分为A组和B组,每组34例。A组采用多西他赛+顺铂(docetaxel

and cisplatin,DP)及吉非替尼化疗,B组在A组化疗方案的基础上加用重组人血管内皮抑制素。采用免疫组化的方法检测表皮生长因子受体(epidermao growth factor receptor,EGFR)、KRAS基因(K-ras,p21)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)、乳腺癌1号基因(breast 有 cancer susceptibility gene 1,BRCA1)、棘皮动物微管相关类蛋白4与间变性淋巴瘤激酶融合基因(echinoderm mierotubule-associated protein-like-4-anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)、核苷酸切除修复交叉互补1(excision repair cross complementing 1,ERCC1)、β-微管蛋白和分化抗原簇3(Cluster of differentiation 3,CD3)生物学标记物的表达情况。结合2组患者生物学标志物的表达情况和无进展生存期(progression free survival,PFS),统计出适合不同方案的人群类型。结果 B组的中位PFS较A组显著延长;无论VEGF和BRCA1低表达或高表达,B组的中位PFS较A组显著提高;ERCC1、KRAS、EML4-ALK和β-微管蛋白高表达,B组的中位PFS较A组有显著提高;EGFR和CD3低表达,B组的中位PFS较A组显著延长(P<0.05)。结论VEGF和BRCA1高表达或低表达,KRAS、ERCC1、EML4-ALK和β-微管蛋白高表达及EGFR和CD3低表达的非小细胞肺癌患者对DP及吉非替尼联合重组人血管内皮抑制素靶向治疗较为敏感。
肺癌脑转移是肺癌晚期严重并发症,其中大部分为非小细胞肺癌来源。目前对非小细胞肺癌脑转移若不治疗,整体生存中位时间约2~3个月。传统治疗包括:系统性化疗、全脑放疗、立体定向伽马刀放射治疗及手术切除,但患者总体生存中位时间也不超过1年。近几年,大量临床资料显示靶向治疗用于非小细胞肺癌脑转移能显著改善患者的预后及生存时间,但随着治疗时间的延长,几乎都出现耐药现象,耐药机制有待进一步研究。本文就非小细胞肺癌脑转移靶向治疗及耐药机制的研究进展进行综述。
恶性肿瘤基础与临床的相关研究成果正日新月异地推动着临床肿瘤学的发展与进步。因此,在现有基础上,有必要对高等医学院校临床医学生进行更为系统、全面、优化的《临床肿瘤学》理论与实践相关内容的教学。全文就如何构建完善的《临床肿瘤学》教学体系,包括国内外教学研究趋势、教学内容、教学方法等提出一点建议。
外周T细胞及自然杀伤细胞(T/NK)淋巴瘤是一组少见而又异质、以侵袭性强为特征的恶性肿瘤。由于对该组疾病的病理生物学、特别是遗传和分子生物学改变所知甚少,当前世界卫生组织(WHO)分类根据临床表现将其定义的诸多病种归类到白血病、皮肤肿瘤、结外病变以及淋巴结病变这几组疾病之中。近年来,有关T/NK细胞的亚群构成以及细胞分化方面的研究进展有助于我们更深入了解这些肿瘤的生物学特性。此外,一些新的遗传学改变以及信号路径调节失常也正被发现,这些分子层面的异常,不仅能用作诊断和预后标志物,还是研发治疗新措施的潜在靶点。
在晚期结直肠癌的疗效评价中,总生存期(overall

确认细节 survival)、无进展生存期(progression free survival)及基于实体瘤的疗效评价、生活质量及药物不良反应等疗效评价标准在临床中已得到了广泛的运用,但是在临床使用中其各自的疗效评定价值及意义却各不相同.同时,随着分子靶向药物及新的治疗方法的开展,现有疗效评价标准的缺点也不断的显露出来.因此,探索能够早期有效反映药物及治疗方法有效性的疗效评定指标成为必然.

In this review,we discuss the role of TGF-β in inflammation and carcinogenesis of the GI tract related to abnormal TGF-β signaling.
目的设计合成1,3,5-三取代吡唑类化合物,并研究其对ALK5所介导的TGFβ信号通路的抑制活性,以期发现新型ALK5抑制剂。方法先以取代的苯甲醛和4-乙酰苯甲腈为原料,合成取代的查儿酮,再与芳基肼或芳基肼盐酸盐反应生成1,3,5-三取代吡唑啉,然后氧化脱氢得到相应的1,3,5-三取代吡唑类化合物,最后对官能团做适当的变换,得到目标化合物;应用基于细胞的TGF-Smad2检测评价了化合物的ALK5抑制活性。结果与结论合成29个未见报道的新目标化合物,其结构均经核磁共振谱与质谱确证,其中化合物6c显示有较好的ALK5抑制活性。

通过研究转化生长因子β(transforming

PLX-4720分子重量 growth factor-β,TGF-β)的特异性小分子拮抗剂SB-431542对梅花鹿鹿茸软骨层细胞增殖的影响,探讨转化生长因子β在鹿茸快速生长中的调节机制。分离培养生长30天的梅花鹿鹿茸软骨层细胞,将传代培养第2代的细胞经不同浓度的SB-431542(0、1、3、5、8、10μmol/L)作用,培养48h后用MTT法测其细胞增殖的变化,并用SPSS软件分析其差异性。结果显示,SB-431542处理组细胞增殖活性都低于对照组(P<0.01),随着添加SB-431542浓度的升高,对细胞的生长速度抑制更加明显,试验结果表明,TGF-β对维持梅花鹿鹿茸软骨层细胞的快速增殖有重要作用。
青光眼滤过术是目前抗青光眼药物无法控制眼压时青光眼的首选手术方法。但术后结膜下瘢痕形成导致滤过泡通道建立失败一直是困扰青光眼治疗的一个重要因素。目前抗眼表瘢痕形成药物的基础和临床研究虽取得了一定的成果,但寻求一种效率高、安全稳定的抗瘢痕药物仍是一个尚待解决的难题。本文就青光眼术后抗瘢痕形成药物的相关研究作一综述,着重介绍细胞因子相关抗瘢痕药物的研究。
目的研究TGF-β/Smads信号转导通路对急性肺损伤后细胞外基质代谢的影响,以了解该信号转导通路在肺纤维化发生过程中的调控作用。方法用SB431542抑制活化素受体样激酶5(ALK5)来抑制TGF-β/Smads通路。24只雄性SD大鼠,随机分为对照组、烧伤组、早期处理组、后期处理组,每组6只。对照组施行假烫,其他3组大鼠造成30%TBSAⅢ度烧伤。早期处理组分别于烧伤后、1×24 h、2×24 h后腹腔注射SB431542,而后期处理组分别于3×24 h、4×24 h、5×24 h后腹腔注射SB431542,28 d后取肺组织,采用real-ti me PCR法检测MMP-2、MMP-9和TI MP-1 mRNA转录水平;用羟脯氨酸测试盒测定羟脯氨酸含量;并行肺脏病理学检查及评分。统计学处理采用SPSS13.0软件进行单因素方差分析判断组间差异,P
分离培养梅花鹿鹿茸间充质层细胞和前成软骨层细胞,通过研究TGF-β的特异性小分子拮抗剂SB-431542对这两种细胞增殖的影响,探讨TGF-β在鹿茸间充质层细胞和前成软骨层细胞增殖与分化中的调节机制。从生长30天的梅花鹿鹿茸中分离间充质层细胞和前成软骨层细胞,进行体外培养,将传代培养第2代的间充质层细胞和前成软骨层细胞分别在含不同浓度TGF-βⅠ型受体特异性抑制剂SB-431542(0、1、3、5、8、10μmol/L)的培养液中培养,48h后用MTT法测定这两种细胞增殖活性的变化,用SPSS软件对其增殖的差异性进行分析。结果显示,体外培养的鹿茸间充质层细胞呈成纤维细胞样,前成软骨层细胞呈纺锤形或梭形,台盼兰染色显示细胞活性均在90%以上。经SB-431542处理的间充质层细胞的增殖活性低于对照组(P<0.05),而前成软骨层细胞增殖活性高于对照组(P<0.01)。试验表明,TGF-β可能在维持鹿茸间充质层细胞的快速增殖和诱导间充质细胞向软骨细胞分化等过程中起重要的作用。
探讨冷藏是否导致新鲜冰冻血浆(fresh

Selumetinib化学结构 frozen plasma,FFP)中的转化生长因子-β(transform growth factor-β,TGF-β)发生变化并降低其对内皮细胞迁移的诱导能力及其分子机制.为证实冷藏可能导致FFP中TGF-β的水平升高进而影响其功能,首先采用ELISA法分析当天解冻FFP(FFP 可能 Day 0)和解冻后4℃冷藏1～5天FFP中TGF-β含量,迁移实验及Western blot分析比较FFP(Day 0)和FFP(Day 5)处理人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMECs)后的细胞迁移率及TGF-β信号通路Smad2和Smad3磷酸化,进一步采用ALK5-siRNA和ALK5特异性抑制剂阻断细胞TGF-βⅠ型受体ALK5的活性,分析下调TGF-β/Smad2/3信号传导后的内皮细胞迁移率.结果显示:随着冷藏时间的延长,FFP中TGF-β1水平逐渐增加,其增加率为244.31

ng/(L.d)(P
目的探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1/Smad信号传导通路在肾小球系膜细胞(glomerular measanial cell,GMC)中的作用,观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)福辛普利(fosinopril,Fos)在该通路中对磷酸化Smad2/3(phosphorylationSmad2/3,P-Smad2/3)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)表达的影响,阐明福辛普利的肾保护作用机制。方法采用经典方法进行大鼠肾小球系膜细胞复苏、培养和传代后,将其按处理方式分为3组:TGF-β1组(TGF-β15ng/mL处理);②Fos组(TGF-β15ng/mL+Fos1×10-4mol/L处理);③对照组(空白)。甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法分别检测3组肾小球系膜细胞增殖光密度(optical density,OD)值,计算细胞抑制率;间接免疫荧光法检测磷酸化Smad2/3表达情况;酶联免疫吸附测定(enzyme linkedi mmunosorbent assay,ELISA)法测定Ⅰ型胶原蛋白的变化,计算抑制率。结果各时间点肾小球系膜细胞增殖荧光强度比较,TGF-β1组明显高于对照组,Fos组低于TGF-β1组,差异有显著意义(P<0.

01)。Wortmannin对MCF-7/MXT细胞内MXT的积聚、外排,线粒体膜电位及细胞周期分布都没有影响。LY294002使MXT对MCF-7/MXT的半抑制率减少了35.4倍。在LY294002的共同作用下,MCF-7/MXT细胞二小时MXT的积聚增加了14倍,1小时的外排减少了4倍。MXT单药作用会引起MCF-7/MXT细胞显著的G2/M期和轻微的S期阻滞,LY294002单药作用会引起G0/G1期阻滞,而MXT和LY294002联合作用96小时,导致MCF-7/MXT细胞明显的S和G2/M期阻滞。MXT或LY294002单独处理MCF-7/MXT细胞24小时都不会引起细胞线粒体膜电位下降,而联合处理24小时却显著地降低了细胞线粒体膜电位。LY294002的作用导致了PI3K下游靶点Akt磷酸化即活性的下降。在LY294002与MXT联合作用下,caspase

一般 8,9,3,7及PARP的活性都有不同程度的增加。LY294002与MXT单独或联合作用都导致了Bcl-2表达明显的下调。 由此可见,LY294002可能通过抑制PI3K活性和BCRP外排MXT的功能,激活细胞内与细胞外依赖性两条细胞凋亡信号通路,从而逆转MCF-7/MXT细胞对MXT的耐药。同为PI3K抑制剂,wortmannin却不能增加MCF-7/MXT对MXT的敏感性,其原因可能是wortmannin在溶液中的半衰期只有4至6小时,也可能与其分子结构不能抑制BCRP外排MXT有关,或与LY294002在细胞内还有其它功能有关,如抑制钙、钾离子通道、DNA依赖性蛋白激酶、钙蛋白激酶等等。LY294002与MXT联合作用具有良好的临床研究与应用价值。
1.针对B细胞恶性肿瘤的高活性高选择性PI3Kδ激酶抑制剂以及PI3Kδ/VPS34双重抑制剂的发现研究PI3Kδ主要在白细胞中表达,并且在B细胞相关恶性肿瘤细胞如慢性淋巴细胞性白血病,急性髓细胞性白血病中过量表达,有研究结果表明,其与B-细胞相关癌症有密切的关系,因此PI3Kδ激酶在近年来受到药物研究领域的广泛关注。本论文从两个方面对其从药物发现到药物作用机制进行了研究。第一章：针对B细胞恶性肿瘤中PI3Kδ激酶选择性抑制剂PI3KD-IN-015的发现研究。利用计算机辅助设计和药物化学方法,我们发现了一个ATP竞争性的PI3Kδ抑制剂PI3KD-IN-015,生化实验和细胞内实验结果均表明PI3KD-IN-015对PI3Kδ具有较好的选择性,同时对激酶组中绝大多数激酶没有抑制活性。通过抑制PI3Kδ介导的信号通路,PI3KD-IN-015能够在一定程度上抑制各种B细胞相关癌症细胞系的增殖,并且能够诱导B细胞恶性肿瘤细胞系凋亡和自噬,另外,与自噬抑制剂Bafilomycin的组合用药,能够增强PI3KD-IN-015的抗细胞增殖作用。PI3KD-IN-015能够抑制慢性淋巴细胞性白血病人和急性髓性白血病人原代细胞的增殖。以上结果均表明,PI3KD-IN-015可能会是一个潜在的针对B细胞相关恶性肿瘤的候选药物。第二章：靶向B细胞恶性肿瘤中PI3Kδ/VPS34激酶双重抑制剂PI3KD/V-IN-01的发现研究。尽管第一个选择性的PI3Kδ抑制剂CAL1

NVP-BEZ235 01已经取得了临床成功,但是临床试验和基础研究结果均表明抑制PI3Kδ本身对B细胞恶性肿瘤细胞系并没有较强的杀伤效果,在对PI3KD-IN-015的表征上也观测到了类似的现象。一个可能的原因就是抑制PI3Kδ能够诱导细胞自噬,从而保护细胞逃避死亡。由于Ⅲ类P13K亚型PIK3C3/Vps34在自噬的起始和发展中起到重要调控作用,因此我们判断一个PI3Kδ和Vps34双重抑制剂有可能会增强我们所观察到的PI3K8靶向抑制剂的抗增殖活性。通过基于结构的药物设计方法,我们发现了一个高活性的ATP竞争性的PI3Kδ/Vps34双重抑制剂PI3KD/V-IN-01,该化合物对PI3K8和Vps34的IC50分别是6 LY2109761购买 nM和19 nM。对其他的P13K亚型,PI3KD/V-IN-01表现出10-1500倍的选择性,而且并不抑制激酶组中其它激酶。在细胞环境中,PI3KD/V-IN-01对PI3Kδ和其它Ⅰ类P13K亚型中表现出了30-300倍的选择性。跟选择性的PI3K8抑制剂CAL-101和选择性的Vps34抑制剂VPS34-IN-1单独用药结果相比,PI3KD/V-IN-01表现出更好的抗慢性淋巴细胞性白血病细胞系,急性髓性白血病细胞系Burkitt淋巴瘤细胞系的增殖活性。此外我们还观察到FLT3-ITD急性髓细胞性白血病细胞系要比表达野生型FLT3的急性髓性白血病细胞系对PI3KD/V-IN-01敏感。在急性髓性白血病细胞系MV4-11接种的异种移植瘤小鼠模型中,PI3KD/V-IN-01表现出剂量依赖性的的抗肿瘤增殖效果。这些结果提示我们,双重抑制PI3Kδ和Vps34可能会是一种行之有效的改善P13K8抑制剂抗肿瘤效果的方法。2.针对慢性骨髓白血病的高活性高选择性BCR-ABL激酶抑制剂CHMFL-ABL-053的发现研究BCR-ABL融合酪氨酸激酶肿瘤蛋白是诱发费城染色体阳性慢性骨髓白血病(Ph+CML)的关键因素,作为新药研发靶点,人们已经对BCR-ABL进行了大量的探索。但是目前绝大多数针对BCR-ABL激酶的抑制剂均为多靶点抑制剂,特别是他们都能够强烈的抑制与ABL激酶结构相近的cKIT的活性。为了给进一步探究ABL激酶的生理和病理作用提供一个更有选择性的抑制剂,我们从一个多靶点ABL抑制剂GNF-7的二氢嘧啶并嘧啶核心骨架开始,使用药物化学的方法对其进行修饰,发现了一个高活性高选择性的BCR-ABL抑制剂CHMFL-ABL-053,它对ABL1激酶的ICso是70 nM。在DiscoveRx’s KinomeScanTM选择性试验中,CHMFL-ABL-053在激酶组中表现出很高的选择性,S得分(1)=0.

1±356.0)IU/L和(2 709.9±423.9)IU/L,SB216763干预组与模型组相比,Caspase-3活性降低,TUNEL方法检测肝细胞凋亡减少,并且Cleaved Caspase-3的蛋白表达降低。结论在D-GalN/LPS诱导的小鼠急性肝衰竭中,抑制GSK-3β活性可能通过抑制肝细胞凋亡而改善肝损伤。因此,对信号分子GSK-3β活性进行干预有可能为急性肝衰竭的治疗提供一个新的靶点。
目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein

kinase,MAPK)通路在GSK-3β对于巨噬细胞活化过程中可能的作用。方法生长状态良好的RAW264.7细胞分为3组:对照组、脂多糖(LPS)组及GSK-3抑制剂SB216763干预组。在两个时间点(12 h、24 h),采用Western blotting法检测GSK-3β、p-GSK-3βser9、MAPK(c-jun氨基端激酶、细胞外信号调节激酶、p-38)表达情况,Elisa法检测细胞上清中TNF-α的变化,RT-PCR检测细胞中5-LO mRNA变化,电镜下观察RAW264.7细胞形态变化。结果 LPS组与对照组比较,p-GSK-3βser9/GSK-3β比值降低,活性升高;MAPK MLN9708 价格 3条信号通路:磷酸化的c-jun氨基端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38表达增多;TNF-α和5-LO mRNA表达增多(P
目的探讨氯胺酮抗抑郁作用的潜在分子机制,以及对抑郁大鼠缰核β钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(βcalcium/calmolulin-dependent protein kinase typeⅡ,βCaMKⅡ)和谷氨酸受体1(glutamic acid receptor 1,GluR1)分子表达的影响。方法成年Wistar大鼠11只(正常组),Wistar-Kyoto(WKY)大鼠22只随机分为抑郁组和氯胺酮(Ket组)。Ket组给予氯胺酮10mg/kg腹腔注射,抑郁组和正常组则腹腔注射等容量的生理盐水,连续3天。第4天行糖水偏好试验,测定大鼠的糖水偏好程度。第5天行开场试验及强迫游泳试验,测定大鼠的行为。行为学试验结束后0.5h取大鼠脑组织,Western Purmorphamine 价格 blot检测大鼠缰核βCaMKⅡ和GluR1的表达。结果抑郁组与正常组大鼠相比,糖水百分比降低,站立次数减少,强迫游泳不动时间显著增加,缰核βCaMKⅡ的表达水平升高(P<0.05);Ket组与抑郁组大鼠相比,糖水百分比升高,站立次数增加,强迫游泳不动时间缩短,缰核βCaMKⅡ的表达水平降低(P<0.05),GluR1的表达无变化。结论氯胺酮具有快速的抗抑郁作用,其机制可能与缰核βCaMKⅡ的表达下调有关。
弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的发病机制虽未完全阐明,但研究显示与信号通路表达异常有关,如经典Wnt通路。在DLBCL发病机制的研究中观察到经典Wnt通路的重要下游因子β-catenin的表达和核内定位。同时证据显示经典Wnt通路不仅与DLBCL发病机制有关,还和DLBCL临床分期密切相关,经典Wnt通路通路有可能成为治疗DLBCL潜在的有用靶点。
Wnt信号通路,是软骨分化中重要而复杂的调节通路,是软骨细胞增殖分化及软骨功能维持的重要调节者之一。在过去的20年中,Wnt信号通路在软骨分化中的作用已被广泛阐明。Wnt蛋白作为Wnt通路的重要组成部分,贯穿软骨分化的各个环节,并与其他通路(NOTCH、Ihh等)有着密切联系,共同参与软骨分化的各个阶段。本综述将简要地介绍Wnt信号通路的机制及其作用,并集中近几年国内外的研究成果,更全面地阐明Wnt信号网络,为相关科研和临床应用提供最新的理论依据。
目的:评价脊髓糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)信号通路在大鼠慢性吗啡耐受形成中的作用。方法:健康雄性SD大鼠,体重200~250

MLN0128购买 g,经枕骨大孔行鞘内置管。取鞘内置管成功的40只大鼠,采用随机数字表法,将大鼠随机分为5组(n=8):生理盐水组(C组)、慢性吗啡耐受组(M组)、吗啡+GSK-3β抑制剂(SB216763)组(MS组)、GSK-3β抑制剂组(S组)和二甲基亚砜组(D组)。皮下注射吗啡10 mg/kg,每天2次,连续5 d,建立吗啡耐受模型。在第6天皮下注射吗啡前30 min MS组、S组和DMSO组分别鞘内注射SB216763(溶于10μl DMSO中)14 pmol、SB216763(溶于10μl DMSO中)14 pmol和DMSO 10μl。于皮下注射吗啡前1 d(基础值)、皮下注射吗啡后30 min第1、2、3、4和5天,第6天鞘内注射后1 h,测定大鼠甩尾潜伏期,以计算最大抗伤害效应百分比(MPAE)。鞘内注射4 h后取8只大鼠,处死后取脊髓组织,采用Western blot法测定p-GSK-3β的表达水平。结果:与第1天比较,M组和MS组第4、5天MPAE明显降低(P<0.05);与C组比较,M组和MS组MPAE升高,M组脊髓GSK-3β表达没有变化,MS组脊髓p-GSK-3β表达上调(P<0.05),DMSO组和S组上述指标差异无统计学意义;与M组比较,MS组MPAE升高,脊髓p-GSK-3β表达上调(P<0.