在这样的背景下,通过干预表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)酪氨酸激酶信号转导以治疗NSCLC的酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor, TKI)逐渐成为我们关注的焦点.随着医学分子生物学技术的发展和肺癌分子发病机制的研究,以吉非替尼和厄洛替尼为代表的EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)为部分NSCLC患者带来了显著疗效,其中又以女性、不吸烟、东亚人种及EGFR敏感突变患者的治疗效果尤为突出.但无论近期疗效如何,最终患者都不可避免的产生耐药及病情进展.因此,了解EGFR-TKI耐药机制有利于指导临床制定克服耐药的策略.故本文对EGFR-TKI的耐药机制及可能的对策进行综述.
在世界范围内胃癌是发病率和死亡率非常高的恶性肿瘤,严重威胁着人类的健康。但是目前胃癌的发病机制尚未完全明确，认为其发生、发展是一个多阶段、多步骤的复杂的生物学过程，与肿瘤细胞信号传导的异常改变关系密切。间隙连接是由连接蛋白组成的相邻细胞间进行信号传导的细胞膜通道，间隙连接在多种肿瘤中常发生异常改变，与肿瘤的发生、转移等密切相关。Cx43是目前研究最广泛的连接蛋白。PI3K/Akt信号通路是细胞内重要信号传导通路之一，该通路的活化可以抑制细胞凋亡、促进细胞增殖和血管生成，在肿瘤发生发展中起着重要的作用。 Fedratinib 价格 为了研究胃癌细胞与细胞间信号传导与细胞内信号传导的关系，我们检测不同分化程度的胃癌组织及正常组织中Cx43与PI3K、Akt的表达，观察胃癌中Cx43与PI3K/Akt信号传导通路的关系，为胃癌的发病机制的研究提供新的思路，同时也为药物治疗提供潜在的作用靶点。

第一部分Cx43与PI3K/Akt在胃癌发生、发展中表达的意义 目的 通过免疫组织化学法、Western blotting技术及RT-PCR方法（反转录聚合酶链式反应）检测Cx43、PI3K和Akt蛋白及mRNA在胃癌组织和正常胃组织中的变化，为胃癌的发病机制的研究提供新的思路，同时也为胃癌的药物治疗提供潜在的作用靶点。 方法 收集承德医学院附属医院2012年7月至2013年2月手术切除的胃癌组织60例及距癌边缘10cm以上正常胃组织25例，术前均未行化疗、放疗，所有病例均经术后病理学检查证实为胃腺癌，相应癌旁组织均未见癌累及。采用免疫组织化学法及Western blotting技术检测Cx43、PI3K和Akt蛋白在正常胃组织及胃癌组织中的表达情况；利用RT-PCR技术检测在正常胃组织与胃癌组织中Cx43、PI3K和Akt selleck合成 mRNA表达水平，并结合临床病理学资料对实验数据进行统计学分析。 结果 1.免疫组织化学结果 1.1Cx43、PI3K和Akt蛋白在不同组织中的表达 在正常胃组织中Cx43蛋白的阳性表达高于胃癌组织中的表达(P<0.05)，PI3K和Akt蛋白在胃癌组织中的阳性表达高于在正常胃组织中的表达(P0.05）。 还有 1.3Cx43、PI3K和Akt蛋白在胃癌不同临床病理特征中的表达 1.3.1胃癌组织中高中分化者Cx43蛋白的阳性表达高于低分化者表达(P<0.05)胃癌组织中高中分化者PI3K和Akt蛋白的阳性表达低于低分化者的表达(P<0.05)，胃癌组织中浸润深度未侵及浆膜层PI3K和Akt蛋白的阳性表达低于侵及浆膜层中的表达(P<0.05)，胃癌组织中无淋巴结转移者PI3K和Akt蛋白的阳性表达低于有淋巴结转移者的表达(P<0.05)，PI3K和Akt蛋白在胃癌组织中的表达量高于在正常胃组织中的表达(P0.05）。 2.3Cx43、PI3K和Akt蛋白在胃癌不同临床病理特征中的表达 2.3.1在胃癌组织中高中分化者Cx43蛋白表达量高于低分化者(P<0.05)，胃癌组织中高中分化者PI3K和Akt蛋白表达量低于低分化者的表达量(P<0.05)，胃癌组织中浸润深度未侵及浆膜层PI3K和Akt蛋白表达量低于侵及浆膜层中的表达量(P<0.05)，胃癌组织中无淋巴结转移者PI3K和Akt蛋白表达量低于有淋巴结转移者的表达量(P0.05）。

3.3Cx43mRNA、PI3K mRNA和Akt mRNA在胃癌不同临床病理特征中的表达 3.3.1胃癌组织中高中分化者Cx43mRNA的表达高于低分化者的表达(P
目的：研究c-met、CD44v5、RECK基因在食管鳞状细胞癌组织及对应癌旁组织中的蛋白表达情况,探讨其与临床病理的关系。方法：应用免疫组织化学(S-P)方法分别检测100例食管鳞状细胞癌组织及对应癌旁组织中c-met、CD44v5及RECK基因的蛋白表达情况。结果：1.c-met基因的表达情况：c-met基因在100例食管鳞状细胞癌组织及对应的癌旁组织中,共同表达阳性33例,共同表达阴性4例。差异有统计学意义(P<0.05)。c-met基因的蛋白表达在浸润深度、淋巴结转移及TNM分期差异有统计学意义(P0.05)。2.CD44v5的表达情况：CD44v5基因在100例食管鳞状细胞癌组织及对应的癌旁组织中,共同表达阳性20例,共同表达阴性10例,表达差异有统计学意义(P<0.05)。CD44v5的表达在淋巴结转移、TNM分期的差异有统计学意义(P0.05)。3.RECK的表达情况：RECK基因在100例食管鳞状细胞癌组织及对应的癌旁组织中,共同表达阳性26例,共同表达阴性4例,表达差异有统计学意义(P<0.05)。RECK的表达在浸润深度、淋巴结转移及TNM分期的差异有统计学意义(P0.05)。4.不同民族间c-met、CD44v5、RECK基因的蛋白表达情况：在哈族(50例)和汉族(50例)食管鳞状细胞癌组织及对应癌旁组织中c-met、 CD44v5、RECK基因的蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。5.食管鳞状细胞癌组织中,c-met、CD44v5和RECK基因的蛋白表达之间相关性：两两比较三个基因在癌组织的表达情况,差异无统计学意义(P>0.

5min时骨架便开始明显发生重组，细胞周边出现肌动蛋白聚集而形成的尾足；而在诱导5小时细胞中，细胞骨架的重组发生在HGF刺激后大约1min，在维持18h和48h阶段的细胞中，细胞骨架的重组发生在HGF刺激后大约1.5min，这说明随着分化的进行细胞骨架的重组对HGF的刺激敏感性下降。 综上，HGF能够趋化不同分化状态下BMSCs的定向迁移，PI3K/Akt和MAPKs信号通路参与介导了这些过程；成神经分化的BMSCs趋向HGF的迁移能力与其分化状态密切相关，不同的信号通路介导了不同分化状态的细胞向HGF的迁移。并且，HGF诱导的MSCs的细胞骨架的重组也与细胞的分化状态密切相关。本研究为进一步揭示BMSCs的定向迁移机制及临床应用BMSCs进行移植提供了理论基础。
研究背景

西洛他唑是1978年日本大冢制药有限公司合成的抗血小板类化合物,1988年作为治疗慢性动脉闭塞症的药物在日本上市。随着大型循证医学证实,西洛他唑可以显著改善慢性动脉闭塞症引起的下肢溃疡、疼痛、发冷和间歇性跛行等缺血性症状,1999年美国FDA批准其作为治疗稳定性间歇性跛行的药物上市。成为美国市场上第一个获得作为治疗该适应症的抗血小板聚集的药物；在临床上还被应用于治疗糖尿病等引起的外周血管性疾病。 西洛他唑是一种选择性磷酸二酯酶3抑制剂,可抑制血小板及平滑肌内磷酸二酯酶的水解,增加细胞内cAMP水平,具有抗血小板聚集及血管扩张作用。近年来还发现西洛他唑有抗炎作用及抗平滑肌细胞增殖的作用,支架植入术后应用西洛他唑可减少新生内膜的增生和重构,有抗晚期血管再狭窄的作用。这些效应将作为西洛他唑抗血小板效应的补充且使之成为缺血性疾病独特的重要治疗。 哪里 一、西洛他唑对动脉粥样硬化中血管内皮细胞的作用 动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)是常见的血管病变,是缺血性心脑血管疾病的常见原因,严重的危害着人类的健康。既往的观点认为,AS是机体脂质代谢障碍的结果,随着研究的深入,目前大多数学者认为AS是血管炎症性损伤的一种表现,认为AS是血管内皮细胞功能发生紊乱后的炎症反应及在此基础上的损伤-修复过程。血管内皮细胞(Vascular Endothelial Cells, VEC)既是血管内壁的一道机械屏障,又是一个具有高度活性的、位于血液和组织分界内表面的人体最大的内分泌器官。它具有细胞通透性、选择性屏障、止血、抗凝、纤溶、血液传输和血管活性物质代谢及调节血管运动张力、产生生长因子、纤维基质增生等作用,参与炎症反应,影响血管发生、血管通透性及液体平衡等。在动脉粥样硬化早期阶段,损伤部位活化的内皮细胞会分泌黏附分子和化学趋化因子,如血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和单核细胞趋化蛋白(MCP-1),导致免疫细胞和单核细胞聚集并迁移到血管壁内膜。VCAM-1在早期粥样硬化斑块形成时起主要作用,并且MCP-1是慢性炎症反应的媒介,二者可使单核细胞黏附。另外,活性氧与TNF-α也参与动脉粥样硬化的形成。有研究表明细胞核因子-κB

更多 (NF-κB)激活基因在人类动脉粥样硬化的血管中表达增高。 作为一种新型的磷酸二酯酶3(PDE3)抑制剂,西洛他唑的基本作用是抗血小板聚集。它有许多额外的细胞作用靶点：可抑制PDE活性和阻碍环磷酸腺昔(cAMP)降解及转化,可预防动脉粥样硬化和血栓形成及血管阻塞；减少黏附分子的表达(如VCAM-1),抑制细胞因子释放和起效(如MCP-1、PDGF和]NF-α等),具有抗炎和抗动脉抗粥样硬化的作用；此外,通过提高细胞内cAMP水平扩张血管,促进血管内皮恢复和抑制血管增生,提高组织灌注,对缺血性脑组织起神经保护作用。研究发现西洛他唑对血管内皮细胞有明显的保护作用,MATSUMOTO等的动物实验表明西洛他唑能通过增加内皮依赖性超极化因子的反应来改善2型糖尿病大鼠肠系膜动脉内皮细胞的功能。进一步的研究表明,西洛他唑可能通过ERK1/2和P38MAPK依赖途径对抗由脂多糖介导的内皮细胞凋亡。除此之外,西洛他唑还有抑制炎症细胞对内皮细胞的黏附作用及抑制内皮细胞表达的作用,MORI等发现通过上调单核细胞cAMP的浓度,西洛他唑有抑制单核细胞对内皮细胞黏附的作用。 二、西洛他唑对血管平滑肌细胞的作用血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)是血管壁的主要成分之一,是决定血管活性和血管构型的重要因素。其增殖在动脉粥样硬化、血管再狭窄和高血压等多种血管性疾病的形成机制中起着重要作用。在参与AS形成的细胞体系中,其中VSMC是增殖体系中最活跃的细胞。临床及实验研究均证实西洛他唑能够抑制VSMC增殖及预防冠状动脉介入治疗术后血管再狭窄。西洛他唑可以抑制由不同的生长因子,包括血小板衍生因子(PDGF)胰岛素和胰岛素样生长因子-1诱导的体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞的增殖反应,也可抑制由PI3GF诱导的体外培养的人血管平滑肌细胞的增殖反应。近年来的研究还显示,血浆PAI-1的水平与冠心病、内膜增生和再狭窄密切相关,而西洛他哗能通过各种机制包括下调TGF-B,

PLX-4720体外 JNK和P38信号途径,抑制相关细胞因子的表达,从而起到抗血管平滑肌细胞增殖的作用。 三、西洛他唑对丝裂原活化蛋白激酶的作用 丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)家族属于高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,广泛分布于真核生物胞浆中。MAPK信号通路是一条细胞外信号引发细胞核内反应的重要途径,在细胞形成、分化、生长、增殖及凋亡过程中发挥着重要作用。目前发现MAPK家族有四条信号通路：即细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)、c-Jun N端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)、p38MAPK和ERK5/BMK1通路。经典的MAPK级联反包括3个激活步骤MAPK激酶激酶(mitogen-activated protein kinase ki-nase kinase, MAPKKK)激活后磷酸化并激活MAPK激酶(mitogen-activated protein kinase kinase, MAP-KK),接着MAPKK通过双重磷酸化邻近的苏氨酸和酪氨酸而激活MAPK,激活后的MAPK可由胞浆转运至细胞核内作用于靶目标。大量事实表明MAPK也是西洛他唑的作用靶点。 研究目的 西洛他唑目前在临床上广泛应用于血管性疾病包括缺血性心脑血管疾病的一级和二级预防,也是抗血小板药物治疗的基础。已有大量临床研究证实,西洛他唑可减少与动脉粥样硬化有关疾病的发生。血管内皮细胞功能障碍和血管平滑肌细胞增殖在动脉粥样硬化发生发展中起重要作用。本研究旨在分别观察西洛他唑对体外培养的血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的增殖及磷酸化P38MAPK丝裂原活化蛋白激酶表达的影响,以进一步从细胞和分子水平上阐述西洛他唑对动脉粥样硬化血管的保护作用。 研究方法 1.

The activity of Nodal signaling can be modulated by microRNAs(miRNAs)as previously reported,but BMN 673半抑制浓度 little is known about which miRNAs are regulated by Nodal during gastrulation.In the present study,we found that the expression of mir206,one of the most abundant miRNAs during

zebrafish early embryo development,is regulated by Nodal signaling.Abrogation of Nodal signal activity results in defective convergence and extension(CE)movements,and these cell migration defects can be rescued by supplying an excess of mir206,suggesting that mir206 acts downstream of Nodal signaling to regulate CE movements.Furthermore,in mir206 morphants,the expression of cell adhesion molecule E-cadherin is significantly increased,while the key transcriptional repressor of E-cadherin,snail1a,is depressed.Our study uncovers a novel mechanism by which Nodal-regulated mir206 modulates gastrulation movements in connection with the Snail/E-cadherin pathway.
青光眼是一组以视神经萎缩和视野缺损为共同特征的疾病,病理性眼压增高是主要危险因素。转化生长因子-β(transforming growth factor beta,TGF-β)是一类生物学功能复杂的细胞因子,与很多眼科疾病密切相关。Smad蛋白家族是TGF-β细胞内信号转导的重要因子。本文就TGF-β/Smad信号通路对青光眼产生的机制及术后手术区瘢痕形成的影响进行综述。
Mounting

evidence in stem cell biology 点击此处 has shown that microRNAs(miRNAs) play a crucial role in cell fate specification, including

stem cell self-renewal, lineagespecific differentiation, and somatic cell reprogramming.These functions are tightly regulated by specific gene expression patterns that involve miRNAs and transcription factors. To maintain stem cell pluripotency, specific miRNAs suppress transcription factors PRT062607 that promote differentiation, whereas to initiate differentiation, lineagespecific miRNAs are upregulated via the inhibition of transcription factors that promote self-renewal. Small molecules can be used in a similar manner as natural miRNAs, and a number of natural and synthetic small molecules have been isolated and developed to regulate stem cell fate. Using miRNAs as novel regulators of stem cell fate will provide insight into stem cell biology and aid in understanding the molecular mechanisms and crosstalk between miRNAs and stem cells.Ultimately, advances in the regulation of stem cell fate will contribute to the development of effective medical therapies for tissue repair and regeneration. This review summarizes the current insights into stem cell fate determination by miRNAs with a focus on stem cell self-renewal, differentiation, and reprogramming. Small molecules that control stem cell fate are also highlighted.

IPO实验IPO干预细胞后Oh、12h、24h分别利用AO-EB法测定细胞平均坏死率,分别观察RSV单独和联合IPO时减轻心肌细胞I/R损伤的作用。 2. RSV联合IPO对p38 MAPK/PPARy/AP-1通路影响IPO后12h,利用Western blotting技术检测p38

MAPK蛋白表达、磷酸化情况,PPARγ、AP-1蛋白表达情况。采用半定量RT-PCR技术检测p38 MAPK、cyclinA2 mRNA表达情况。观察RSV干预后再进行IPO时MAPK信号转导途径的变化。 3. p38 MAPK抑制剂对保护作用及上述通路的影响在以上五组基础上增加RSV+SB+IPO组。RSV+SB+IPO组：给予p38 MAPK抑制剂SB203580 20min, RSV20min,给予IPO。IPO后12h,利用AO-EB法测定细胞平均坏死率,Western blotting技术检测PPARγ、AP-1蛋白表达情况。采用半定量RT-PCR技术检测cyclinA2 mRNA表达情况。观察抑制p38 MAPK对RSV联合IPO的保护作用的影响,以及下游分子PPARγ、AP-1蛋白表达变化。 结果： 1. RSV单独和联合IPO时均可减轻心肌细胞I/R损伤用IPO干预H9c2(2-1)细胞0h、12h、24h后,各时间点IPO组细胞平均坏死率均低于I/R组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。PPARy蛋白水平：SB+RSV+IPO组低于RSV+IPO组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。AP-1蛋白水平：SB+RSV+IPO组高于RSV+IPO组,差异有显著统计学意义(P
免疫抑制剂具有重要的临床应用价值,广泛应用于器官移植抗排斥反应和自身免疫性疾病的治疗,常见的免疫抑制剂有糖皮质激素、维生素D3、环孢素A、雷帕霉素、它克莫司等。这些免疫抑制剂在临床应用的过程中,在产生治疗效应的同时,也具有一定的副作用,因此,研发新的具有治疗作用的免疫抑制剂意义重大。作为我国传统医学中的瑰宝,中草药对疾病的预防和治疗作用,尤其是对炎症、感染、肿瘤、自身免疫、移植排斥等疾病的预防和治疗作用,主要是通过免疫系统实现的。中药中很可能存在具有免疫抑制作用的成分,发现这些成分并研究其功能具有理论和应用价值。由于树突状细胞(Dendritic

哪里 cells, DCs)是机体免疫应答中的关键细胞,该类细胞也很可能是免疫抑制剂的主要的靶细胞,因此,以DCs作为靶细胞很可能筛选到具有抑制作用的中药成分。鉴于此,我们课题组与第二军医大学药学院张卫东教授课题组合作,利用基于DCs分化发育和功能成熟的药物筛选平台,从496种中药单体化合物中成功筛选出18类31个有效单体成分。并选择对DCs分化发育抑制率较高,而本身的细胞毒性较小,且能有效促进DCs分泌IL-10的免疫抑制性的丝毛瑞香的提取物Lariciresinol(分子式C20H2106)作为研究对象,深入研究该成分对DCs的调控及其机制；并使用过敏性自身免疫反应性脑脊髓膜炎(EAE)模型研究了其在体内应用的有效性。 时间 (一)中药单体化合物Lariciresinol对DCs功能的影响 以本身的细胞毒性较小,且能有效促进DCs分泌IL-10的Lariciresinol成分为研究对象,研究了Lariciresinol对DCs的凋亡诱导作用、对DCs吞噬功能、成熟表型、细胞因子分泌、激发同种异体免疫反应和抗原提呈能力的影响。

我们以GM-CSF和IL-4诱导小鼠骨髓细胞生成DCs,并使用药物处理第五天的未成熟DCs24小时,再用终浓度为100ng／ml的LPS刺激24小时,检测相应指标。使用FACS检测annexinV和PI的方法确定了16nmol／ml为Lariciresinol对未成熟DCs的无毒性浓度范围。后期的研究发现,Lariciresinol不能影响DCs的吞噬和分泌IL-12P70、TNF-α和TGF-β的能力,却能明显促进抑制性细胞因子IL-10的分泌,并能抑制DCs激发同种异体免疫反应(MLR)和特异性抗原提呈能力。 (二)中药单体化合物Lariciresinol促进DCs分泌IL-10的机制 研究 IL-10是一种重要的具有免疫负调节作用的细胞因子。Lariciresinol是如何促进IL-10分泌的呢?进一步实验发现,Lariciresinol对DCs分泌IL-10的促进具有Lariciresinol浓度梯度依赖性和LPS的浓度梯度依赖性。那么,促进的信号通路如何呢?我们采用Western Blot技术,Lariciresinol处理第五天的未成熟DCs 24小时,再加入终浓度为100ng／ml的LPS,并在第0、15、30和60分钟,裂解细胞,收集蛋白检测ERK1／2、p38和JNK的磷酸化情况,发现Lariciresinol能够明显增强ERK1／2的磷酸化；ERK1／2信号通路抑制剂PD98059能够抑制Lariciresinol对DCs的IL-10分泌促进作用,另外,p38信号通路抑制剂SB203580,亦能抑制Lariciresinol促进的IL-10分泌作用。由此,证明了Lariciresinol通过ERK1／2信号通路促进DCsIL-10的分泌,而对P38信号可能具有基础性的活化作用。 Selleckchem ARN 509 (三)中药单体化合物Lariciresinol处理的DCs过继转移和Lariciresinol体内注射均能抑制自身免疫病的发生 既然,Lariciresinol可以明显促进DCs分泌IL-10的能力,并能部分抑制DCs的成熟和抗原提呈能力,那么,Lariciresinol:处理的DCs能否通过诱导免疫耐受而抑制自身免疫病的发生呢?Lariciresinol直接体内注射,又如何呢?本部分研究中,我们通过小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,对其抑制作用进行了研究。 以MOG35-55多肽作为抗原,辅以腹腔注射百日咳毒素,成功地建立C57BL／6小鼠的EAE模型。其中抗原肽诱导建立的EAE组小鼠发病率达到95%,平均临床打分为3.16±0.

This concept was designed to describe a material combining diagnosis,treatment and follow up of a disease.It evolved and included molecular targeting and nanotechnologies that incorporate both diagnosis and therapeutics.In this editorial,we are presenting briefly the concept and evolution of theranostics,highlighting

many applications of theranostics in daily practice and discussing future perspectives and aspects of this model in gastrointestincal cancers.
目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、HER-2/neu蛋白在胃癌中的表达及其与预后的关系。方法回顾性分析2006年11月至2013年11月我院收治的90例胃癌患者(观察组)的临床资料,另选取正常胃组织50例作为对照组。观察2组EGFR、HER-2/neu蛋白的表达情况,分析胃癌组织中EGFR、HER-2/neu蛋白表达和临床病理特征的关系。结果观察组EGFR、HER-2/neu蛋白表达阳性率高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05),而与胃癌分化程度、临床分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移密切相关,差异均有统计学意义(P
目的探讨2011年4月至2015年4月基础和临床研究关于棘皮动物微管相关类蛋白4与间变性淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因在肺腺癌中的表达特点及临床意义。方法通过万方医学网和贵州省数字图书馆数据库文献法查询,对5年来发表在国内的有关EML4-ALK的文献进行收集整理和分析。结果共收集符合纳入标准文献21篇,研究病例2

为什么 Dynasore细胞系 550例,总结发现在肺腺癌中,EML4-ALK的检出率为9.61%,不同检测方法检出结果存在一定差异。结论 EML4-ALK在肺腺癌中呈低表达趋势,与肺腺癌的发生、发展有关,可作为新的治疗靶点,但检测方法仍需进一步研究和优化。
以3,4,6-三氯哒嗪和4-碘吡唑为起始原料,分别与芳胺、碘甲烷、N-Boc哌啶-4-甲磺酸酯和2-(2-溴乙氧基)四氢-2H-吡喃通过取代、氧化和Suzuki等反应,合成了16个新型的1-H-[1,2,3]三氮唑并[4,5-c]哒嗪类化合物,其结构经1H NMR和ESI-MS表征。
本文针对转化医学发展现状和本科药理学教学现状,分析探讨了将转化医学思想应用到药理学教学过程中的目的、具体实施方法和思路以及推广过程中可能存在的困难及不足,为基础医学应用型教学模式的改革提供参考。
目的探讨心理干预措施对非小细胞肺癌化疗患者负性心理反应的作用及其对生活质量的影响。方法选择2012年10月至2014年12月间收治的98例肺癌患者,采用随机数字表法随机分为研究组(51例)和对照组(47例)。研究组患者在常规化疗方案的基础上进行心理干预,对照组患者行常规化疗方案。采用抑郁自评量表(SAS)、焦虑自评量表(SDS)和中国癌症化疗患者生活质量调查问卷(QLQ-CCC)评价并比较两组患者的干预效果。结果护理干预前后,两组患者症状自评量表(SCL-90)各因子评分比较显示,干预前两组间各因子的差异均无统计学意义(P>0.05),干预后研究组患者各因子评分均明显降低(P0.05),且研究组患者的各因子评分均低于对照组(P0.05)。干预第8周时,研究组患者评分显著低于首次测评(P0.05),且研究组患者显著低于对照组(P0.05)。护理干预第8和16周时,研究组患者各方面评分均低于对照组(P<0.05)。结论心理干预可以明显改善非小细胞肺癌患者的心理障碍,提高患者的生活质量。
Gastric

cancer is one of Blebbistatin研究购买 the most common malignancies worldwide.The overall prognosis remains poor over the last decades even though improvements in surgical outcomes have been achieved.A better understanding of the molecular biology of gastric cancer and detection of eligible molecular targets might be of central interest to further improve clinical outcome.With this intention,first steps have been made in the research of growth factor signaling.

01),而癌旁组织比远癌组织的表达也有所增加(P<0.05)。MMP-7在肠癌组织的表达较癌旁组织增多,差异显著(P<0.05);MMP-7的mRNA表达在肠癌组织显著高于癌旁组织(P
胃癌是发病率较高的恶性肿瘤,也是导致肿瘤相关死亡的主要病种。胃癌患者中将近20%HER-2表达阳性。HER-2在HER/erb B家族的活化和信号转导中起着重要的作用,参与了肿瘤细胞的增殖、分化、转移和细胞转化,HER-2过表达还与鲍曼分型,淋巴转移,静脉浸润,淋巴管浸润相关,HER-2过表达患者预后往往较差。目前针对HER-2靶向治疗的方法包括单克隆抗体、小分子酪氨酸激酶抑制剂等,都取得了一定的疗效,但同时也出现许多新问题有待解决。
卵巢癌的发生过程中存在磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/m

Wnt agonist TOR)信号通路的激活,该通路的异常激活可促进细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进肿瘤侵袭和转移。PI3K/AKT/m TOR通路靶向抑制剂对卵巢癌显示出一定的疗效,目前该靶向药物的临床试验已开展,并显示出良好的安全性和有效性。针对PI3K/AKT/m TOR的靶向药物将为卵巢癌的治疗指明新方向。
近年来,乳腺癌的分子靶向治疗取得了长足的发展。曲妥珠单抗联合化疗已成为Her-2阳性乳腺癌患者的标准一线治疗。全文从抗Her-2治疗药物,PI3K/AKT/m TOR通路中的抑制剂,抗血管生成治疗药物,针对BRCA1/2突变的PARP抑制剂,细胞周期蛋白依赖性激酶4和6(CDK4/6)抑制剂几个方面就当前乳腺癌分子靶向治疗现状作一综述。
PI3K-AKT-mTOR信号转导通路是哺乳动物肿瘤免疫中重要的信号通路,在多种恶性肿瘤的演变过程中发挥了极其重要的作用。近几年来,随着肿瘤分子生物学的发展,恶性肿瘤的靶向治疗成为研究热点,通过研究探讨PI3K-AKT-mTOR信号通路在肿瘤发生、发展过程中的信号转导机制,联合多种抑制剂或者寻找作用于多种信号通路、多靶点的新药,对于肿瘤的靶向治疗有重要意义。
Glioblastoma

multiforme(GBM),designated as World Health Organization(WHO)grade IV astrocytoma,is a lethal and therapy-resistant brain cancer comprised of several tumor cell subpopulations,including GBM stem cells(GSCs)which are believed to contribute to tumor recurrence following initial response to therapies.Emerging evidence demonstrates Selleck DUB inhibitor that GBM tumors are initiated from GSCs.The development and use of novel therapies including small molecule inhibitors of MK0683核磁共振 specific

proteins in signaling pathways that regulate sternness,proliferation and migration of GSCs,immunotherapy,and non-coding microRNAs may provide better means of treating GBM.Identification and characterization of GSC-specific signaling pathways would be necessary to identify specific therapeutic targets which may lead to the development of more efficient therapies selectively targeting GSCs.Several signaling pathways including mTOR,AKT,maternal embryonic leucine zipper kinase(MELK),NOTCH1 and Wnt/β-catenin as well as expression of cancer stem cell markers CD133,CD44,Oct4,Sox2,Nanog,and ALDHlA1 maintain GSC properties.Moreover,the data published in the Cancer Genome Atlas(TCGA)specifically demonstrated the activated PI3K/AKT/mTOR pathway in GBM tumorigenesis.Studying such pathways may help to understand GSC biology and lead to the development of potential therapeutic interventions to render them more sensitive to chemotherapy and radiation therapy.

05。(3)GCSsiRNA转染K562∕A02细胞24小时后,以Mock组为对照、GAPDH基因为内标,实验组GCS mRNA表达水平明显受抑制,抑制率为69%(58～78% ), P 0.05。与GCSsiRNA转染K562/A02细胞24小时比较,转染48小时后MDR1mRNA表达下调65%(54～74%),P 也许 0.05。(4)与K562/A02细胞空白组比较,转染72小时后GCSsiRNA组和MDR1siRNA组细胞P-gp表达的相对吸光度值分别下调1.44倍和3.54倍, P
目的探讨IL-29和IL-10单独和联合脂多糖刺激Hela细胞后IL-15和IL-6转录水平的变化,分析其激活的信号转导通路。

方法培养的Hela细胞,经不同浓度的LPS及IL-10(IL-29)单独或联合处理后,提取细胞总RNA和总蛋白,RT-PCR分析IL-15和IL-6转录水平的变化,Western blot分析信号转导通路蛋白变化。 结果1. RT-PCR分析显示: ①1 ng～10μg LPS刺激Hela细胞12 h后,IL-15mRNA和IL-6mRNA水平均明显上调(与对照组比较:P0.05)。不同浓度的IL-10(1,10,100 ng/mL)均下调100 ng/mL LPS诱导的Hela细胞IL-15mRNA和IL-6mRNA的表达,且浓度越高IL-10抑制作用越明显。 ③单独IL-29(100ng/ml)作用能显著降低Hela细胞IL-15和IL-6转录水平。IL-29和LPS联合作用Hela细胞后,IL-29亦能显著抑制LPS诱导的IL-15和IL-6转录,并且在一定浓度范围内(80～240ng/ml)存在剂量依赖性(与LPS组比较,P0.05)。

结论IL-10和IL-29均能抑制LPS诱导的炎症细胞因子IL-15和IL-6的转录,且发现IL-10下调作用可能与其能阻断AKT的激活有关。因而,我们推测IL-29可能具有类似IL-10的抗炎作用,为某些临床感染性疾病的预防和治疗带来新的希望。
为了研究氧化应激影响肉仔鸡肉品质的主要MAPK信号转导通路,论文分为肉仔鸡胸肌骨骼肌卫星细胞氧化应激模型优化,氧化应激状态下起主要作用的MAPK信号通路的筛选,抗氧化物质对信号通路的作用及维生素C和茶多酚对慢性应激条件下肉仔鸡生产性能的影响及其MAPK通路四个部分,采用细胞模型和动物应激试验相结合的方法,研究了氧化应激时MAPK信号通路的改变对鸡肉品质的影响机理。现分别摘要如下: 试验一肉仔鸡胸肌卫星细胞氧化应激模型的优化 AUY-922研究购买 【目的】以地塞米松(DEX)处理肉仔鸡胸肌卫星细胞(SCs),筛选DEX的最佳作用时间和浓度,以优化肉仔鸡卫星细胞的氧化应激模型。【方法】将体外培养的肉仔鸡胸肌SCs按DEX处理浓度(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48和0.96 mg/ml)分为7组,分别测定培养不同时间(6 h、12 h、24 h和48 h)点SCs的存活率(MTT法),细胞及培养液丙二醛(MDA)、氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转酶(GST)含量或活性。【结果】随DEX浓度升高,SCs中MDA和ROS含量极显著升高(P<0.01)、SOD和GST活性极显著降低(P0.05)。单独抑制剂处理组SCs中SOD和GST活性均显著高于DEX处理组(P0.05)。DEX能抑制SOD和GST基因的表达,抑制率高于37%;与抑制ERK5和ERK1/2通路不同,抑制p38MAPK和JNK通路后,DEX对SOD和GST基因的表达无明显抑制作用。【结论】研究揭示,在DEX诱导肉仔鸡胸肌SCs产生氧化应激过程中,p38MAPK和JNK通路起着关键作用。

Selleck FHPI 试验三氧化应激条件下抗氧化物质对p38MAPK和JNK通路的调节作用 【目的】探讨肉仔鸡胸肌SCs氧化应激时,抗氧化物质(维生素C(VC)、维生素E(VE)、茶多酚(TP)、大豆黄酮(DZ)和吡咯喹啉醌(PQQ))对p38及JNK信号通路的作用。【方法】将培养的肉仔鸡胸肌SCs分为12个处理(对照、DEX、p38抑制剂、p38抑制剂+ DEX、JNK抑制剂、JNK抑制剂+ DEX、VC + VE + DEX、VC + DEX、VE + DEX、TP+DEX、DZ + DEX和PQQ + DEX),分别测定SCs培养基中MDA、ROS、SOD和GST含量或活性,并检测MEK3和MEK4基因表达及抗氧化酶基因表达。【结果】与DEX处理相比,所有抗氧化物质处理均显著降低了SCs中MDA与ROS的产量(P<0.05),其中VC和TP处理组极显著地降低了MDA和ROS的产生量(P<0.01);抗氧化物质处理组SOD和GST活性极显著地高于DEX处理组(P0.05);28～42 d。与对照组相比,VC+DEX、TP+DEX组,以及DEX处理组,肉仔鸡日采食量和日增重均未受到影响(P>0.05);应激处理组(添加DEX)肉仔鸡的生产性能极显著低于非应激组(未添加DEX)(P<0.01),MDA产生量显著低于DEX组(P0.05);TP与VC下调了MEK3和MEK4表达量,上调了SOD和GST的表达量;42d,VC和TP处理组肉仔鸡胸肌SOD和GST活性显著高于DEX处理组(P0.05);VC+DEX和TP+DEX组SOD和GST活性均高于DEX组,但差异不显著(P>0.

1及NF-κB P65、P50;(5)实时定量RT-PCR法检测CollagenⅠ/Ⅲ、TGF-p、ICAM-1、IL-6、TNF-α、IKKβ及NF-κB等mRNA的表达;(6)Western

Blot法检测Ivd3、NF-κB、JNK、IRS-1及Akt等蛋白表达。 结果 1.大鼠代谢指标比较 实验开始时NC组与模型组两组大鼠代谢指标比较:体重(BW)、尾动脉收缩压(SBP)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(IRI)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)等指标均无统计学差异(P＞0.05)。 HF饮食喂养16周后NC组与模型组两组大鼠代谢指标比较:与NC组比较,模型组大鼠BW、SBP、TC、FINS、FBG及IRI升高(P＜0.01),HDL-C降低(P＜0.01)。 药物干预12周后NC、MS及HLJDT三组大鼠代谢指标比较:与NC组比较,MS组大鼠BW、SBP、TC、FINS、FBG及IRI进一步升高(P＜0.01);与MS组比较,HLJDT组大鼠BW、SBP、FINS、FBG及IRI降低(P＜0.01～0.05),HDL-C有所升高(P＜0.05)。 CDK 抑制剂 2.血清ELISA检测 药物干预12周后三组大鼠血清IL-6及TNF-α水平比较:与NC组比较,MS组大鼠IL-6及TNF-α表达升高(P＜0.01);与MS组比较,HLJDT组大鼠IL-6及TNF-α表达降低(P＜0.01)。 3.超声心动图检测 常规超声心动图指标情况:实验开始时NC组与模型组两组大鼠左室舒张、收缩末期内径(LVEDd、LVEDs)、舒张末期室间隔厚度(IVS)及左室后壁厚度(LVPW)、相对室壁厚度(RWT)、左室相对质量(LVRW)、左室短轴缩短率(FS)、舒张早期与舒张晚期峰值速度比值(E/A)及E峰减速时间(DT)均无差异(P＞0.05)。HF饮食喂养16周后,与NC组比较,模型组IVS、LVPW、RWT及LVRW明显增加(P＜0.01),E/A比值明显减小(P＜0.01),DT时间延长但差异无统计学意义(P＞0.05)。药物干预12周后,与NC组比较,MS组IVS、LVPW、RWT及LVRW均明显增加(P＜0.01),E/A比值明显减小(P＜0.01),DT延长(P＜0.05);与MS组比较,HLJDT组IVS、LVPW、RWT及LVRW均明显减小(P＜0.01),E/A比值明显升高(P＜0.05),DT有所缩短但无显著性差异(P＞0.05)。 Selleckchem PR-171 IBS指标情况:实验开始时两组大鼠IVS、LVPW的心肌校正IBS(IBS%)及背向散射积分周期变化幅度(CVIB)均无差异。HF饮食喂养16周后,与NC组比较,模型组IVS、LVPW的IBS%明显升高(P＜0.01),CVIB明显降低(P＜0.01)。药物干预12周后,与NC组比较,Ms组IVS、LVPW的IBS%明显升高(P＜0.01),CVIB明显降低(P＜0.01);与MS组比较,HLJDT组IVS、LVPW的IBS%明显降低(P＜0.05),CVIB明显升高(P＜0.05)。

4.透射电镜检测 NC组左室心肌组织细胞排列整齐,心肌细胞质膜连续、完整;粗细肌丝排列整齐,肌小节及明暗各带清晰可见;线粒体丰富、大小均一、圆形或椭圆形;核膜光滑完整,异染色质成簇状聚集在核周部;闰盘清晰、连续,结构完整;细胞间质可见成纤维细胞和少量胶原纤维;微血管管腔大小正常,内皮细胞结构正常。MS组左室心肌组织细胞部分肌节宽窄不一,有的肌节Z带、I带特征性结构变浅或消失,肌丝排列紊乱,质膜模糊、断裂;一些心肌细胞肌原纤维呈灶性溶解,有残存的膜结构和散乱的线粒体;线粒体明显增多,呈堆积状,肿胀、可见指纹状线粒体;核形状极不规则,多见深的切迹,常染色质呈团块状聚集;闰盘扭曲模糊断裂;微血管管腔狭窄,内皮细胞肿胀明显,呈柱状向管腔突起。HLJDT组左室心肌组织总体较MS组明显好转,细胞排列较整齐;肌原纤维断裂、溶解现象好转,可见T管系统略有扩张;线粒体大小较一致,排列较规整,未见指纹状线粒体;核形状较MS组规则,闰盘基本连续,间质内胶原堆积明显好转,微血管腔内皮细胞肿胀好转。

5.组织病理检测 HE染色显示,NC组心肌细胞排列整齐,细胞核大小均一,胞浆染色均匀;MS组心肌细胞排列紊乱,细胞核大小不甚规则,可见肌纤维断裂、排列紊乱;HLJDT组较MS组明显好转,心肌细胞排列较规整,肌纤维断裂少见,细胞核较规则。 6.Masson染色胶原含量检测 Masson染色显示胶原纤维呈蓝绿色,心肌纤维呈红色或黄色。NC组胶原组织分布均匀,排列整齐;MS组心肌间质胶原纤维明显增多,围绕心肌细胞的胶原纤维断裂、排列紊乱;HLJDT组较MS组心肌间质胶原纤维明显减少,相邻细胞的胶原纤维排列整齐。 定量分析显示:与NC组比较,MS组左室心肌组织胶原含量明显升高(P＜0.01);与MS组比较,HLJDT组左室心肌组织胶原含量明显降低(P＜0.05)。 PF-01367338供应商 7.TUNEL检测 TUNEL染色阳性细胞为细胞核呈棕褐色或棕黄色颗粒。NC组大鼠心肌细胞中可见极少量TUNEL染色阳性细胞。定量分析显示:与NC组比较,MS组大鼠心肌细胞中TUNEL染色阳性细胞明显增多(P＜0.01):与MS组比较,HLJDT组染色阳性细胞明显减少(P＜0.01)。 8.免疫组织化学染色检测 ICAM-1及MCP-1:染色阳性信号为棕色颗粒,定位于心肌细胞胞浆内。NC组心肌细胞胞浆内可见分布均匀、稀疏的浅棕色颗粒;MS组心肌细胞胞浆内可见浓密的深棕色颗粒;HLJDT组心肌细胞胞浆内可见较MS组明显稀疏、浅淡的棕色颗粒。 NF-κB P65、P50:染色阳性信号为棕色颗粒,主要定位于心肌细胞胞核中。NC组NF-κB在少许心肌细胞的胞浆及胞核有弱表达;MS组心肌细胞核着色分布广且呈强阳性染色;HLJDT组较MS组核着色变弱,分布局限。 9.实时定量RT-PCR检测各关键分子mRNA表达水平 与NC组比较,MS组CollagenⅠ/Ⅲ、TGF-β、ICAM-1、IL-6、TNF-α、IKKβ及NF-κB mRNA表达明显升高(P＜0.01);与MS组比较,HUDT组CollagenⅠ/Ⅲ、TGF-β、ICAM一1、IL-6、TNF-α、IKKβ及NF-κB mRNA表达明显下降(P＜0.01～0.05)。 10.Western Blot检测各关键分子蛋白表达水平 与NC组比较,MS组大鼠心肌组织IκB蛋白降解增多(P＜0.01);与MS组比较,HLJDT组大鼠心肌组织IκB蛋白降解减少(P＜0.05)。 与NC组比较,MS组大鼠心肌组织总蛋白及核蛋白NF-κB P65水平均升高(P＜0.

F组P2X4R在致炎后第4天表达增多,于第7天时达高峰,第10天和第14天逐渐下降。2.与NS组相比,M组P2X4阳性细胞表达增多。3.M组和FM组在鞘内第6次予以吗啡后形成吗啡耐受,FM组比M组更易形成吗啡耐受。 结论：P2X4R可能参与大鼠急性吗啡耐受和福尔马林炎性痛的形成。
【研究目的】高分子量激肽原（high

molecular weight kininogen, HK）是血浆激肽释放酶-激肽系统（kallikrein-kinin system, KKS）的主要成分之一，当KKS活化时，HK被降解为活化型的高分子量激肽原（HKa）。众多资料表明，KKS活化参与多种生理与病理学过程，因此认识活化产物HKa的血管生物学功能具有十分重要的意义。内皮祖细胞（EPC）是成熟内皮细胞（EC）的前身，在促进内皮再生和新生血管中发挥重要作用。虽然有研究表明，HKa抑制EC功能，但是HKa是否调控EPC功能不清楚。在这项研究中，我们检测了HKa是否诱导EPCs的衰老，并对其作用的分子机制进行了探索。 【研究方法】（1）我们从人外周血分离EPC，并建立可体外培养的细胞株。（2）为判定HKa是否影响EPC的功能，50nM HKa处理EPCs，检测其对EPC克隆形成及增殖能力的影响。（3）为检测HKa是否加速EPCs衰老，30-100nM HKa处理EPCs，检测酸性β-半乳糖苷酶活性和端粒酶活性情况。（4）为研究HKa加速EPCs衰老的机制，我们分别使用10、30、50、100nM PLK抑制剂 HKa处理EPCs，检测胞内ROS产生、JNK在Thr183/Tyr185位点和转录因子FOXO4在Thr451位点的磷酸化及p38激酶的磷酸化、锰超氧化物歧化酶和p16的表达情况。（5）为确定HKa的功能域，我们构建了人源HK重链（HC,19-380aa）和轻链(LC,390-644aa)重组蛋白，分析HKa作用的结构域。

【研究结果】（1）HKa抑制EPCs克隆形成及增殖能力。（2）HKa处理后的EPC变得大且扁平并出现空泡。使用酸性β-半乳糖苷酶染色法检测，显示HKa导致衰老细胞的百分比增加了2-3倍（P
神经干细胞（neural stem cells, NSCs）通过不断分裂增殖以维持自身稳定，并可分化成神经系统中所有种类的神经细胞，此外还具有高效迁移特性。在胚胎期的神经系统发育过程中，NSCs自脑室侧壁（lateral ventricle, LV）不断迁移至特定区域形成具有特定功能组织，进而构建出复杂的中枢神经系统（central selleckchem nerve system,CNS），而NSCs的迁移缺陷则会导致许多神经退行性疾病；存在于成年大脑侧脑室外侧壁（subventricular zone, SVZ）和海马齿状回（dentate gyrus, DG）区域中的NSCs可定向迁移至分子颗粒层和嗅球（olfactory bulb, OB）等神经发生部位，参与神经组织的形成；最近有研究报道，NSCs还可朝向病灶位点做趋化性迁移，NSCs的这一特性给治疗神经损伤性疾病带来希望。因此，针对NSCs定向迁移机制的研究十分有必要。 有研究报道，大脑损伤区域以及病灶位点分泌多种细胞生长因子、趋化因子以及炎症因子。基质细胞衍生因子（stromal cell-derived factor, SDF-1α）是研究最为广泛的趋化因子之一，它通过与其专一性受体CXCR4结合，激活下游一系列信号通路。其中，PI3K/Akt和MAPKs信号通路参与调节SDF-1α诱导的NSCs的定向迁移。NSCs的迁移受到多种因素的综合调节，除了细胞外因子对其有促进或抑制作用，在特定环境中，还受到细胞自身状态的影响。有研究发现，具有初步分化特征的神经祖细胞（neural progenitor

cells, NPCs）展现出趋化性迁移能力，如：DCX或PSA-NCAM阳性的神经元前体细胞和表达A2B5的少突胶质细胞前体细胞，而未分化的NSCs（高表达干细胞标记物nestin）迁移能力相对低下，大部分停留在初始点。我们猜测处于特定分化阶段的NSCs具有更强趋化性迁移能力。为了验证这一假设，我们选用了来源于小鼠小脑皮层的神经干细胞系C17.2，对其进行分化诱导得到不同分化状态的NSCs并进行表型鉴定；利用Boyden chamber和Dunn chamber趋化性迁移装置检测不同分化状态的NSCs对SDF-1α的趋化性应答差异；通过探测肌动蛋白微丝F-actin的组装与聚合，对不同分化状态的NSCs中细胞骨架的重组频率和微丝的排列分布进行比较；为了进一步探索NSCs迁移与细胞分化状态之间的关系，我们随后在分子水平上研究与迁移分化相关联的内在机制。运用Western 或者 blot技术对细胞内涉及迁移的信号通路如PI3K/Akt和MAPKs蛋白家族信号通路（ERK1/2、SAPK/JNK、p38MAPK信号通路）的激活水平进行检测，分析了在不同分化状态NSCs中这些信号通路对SDF-1α刺激的应答差异；最后，利用特异性抑制剂将上述信号通路分别阻断，通过趋化性迁移实验检测了不同分化状态NSCs的迁移变化。综合上述实验，我们主要得到了以下结果： 1. NSCs向SDF-1α的趋化性迁移能力受分化状态的影响：在Boyden chamber趋化迁移实验中，不同分化状态的NSCs在5ng/ml SDF-1α的诱导下，迁移至下室的细胞数目不同，分化0.5天和1天的NSCs对SDF-1α应答能力最强；同时，分化0天、0.5天和1天的NSCs出现最大迁移数目的SDF-1α浓度为5ng/ml，而分化3天NSCs对应的最佳迁移浓度为50ng/ml，说明不同分化状态的NSCs对SDF-1α敏感程度不同。 2.特定分化阶段的NSCs拥有较强细胞趋化性迁移能力。细胞的迁移速度和迁移效率是构成迁移的基础要素，两者相互独立，受到不同信号通路的调控。在NSCs的不同分化状态下，NSCs具有不同的运动活性。分化0.5天和1天的NSCs随机迁移速度比其他分化状态的NSCs快。同时它们对SDF-1α的响应能力也因分化状态的不同而发生改变；在25ng/ml SDF-1α浓度梯度中，分化1天的NSCs迁移方向性效率最高，并且具有最大迁移速度。 3.

7细胞系,希望通过这一研究体系对Nalplb炎性体的激活机制进行深入研究。一方面,我们使用全基因组RNAi筛选直接在RAW264.7细胞系中通过检测细胞死亡和RFP-ASC成点现象筛选能够影响致死因素激活caspase-1的基因,另一方面,以蛋白酶体和N端规则在Nalplb炎性体激活中的重要作用为起点直接研究UBR家族蛋白成员的作用,这两种不同的研究思路最终都集中到N端规则泛素E3连接酶UBR家族成员UBR2身上,我们发现UBR2的RNAi能够有效的抑制致死毒素对Nalplb炎性体的激活,进而影响caspase-1的激活,细胞死亡和ASC的成点现象。 该研究证实了N端规则泛素化在致死毒素激活Nalplb炎性体过程中的重要作用,并发现了参与其中的泛素E3连接酶UBR2,有助于揭示致死毒素激活Nalplb炎性体的具体机制。
背景与目的：多种病毒可以感染卵巢,影响卵巢功能。而且一些病毒如乙型肝炎病毒(HBV)、及艾滋病毒(HIV)等可能通过感染卵细胞和胚胎而直接传播给后代。然而卵巢、卵细胞及胚胎的天然抗病毒机制,尚未研究。本论文旨在分析模式识别受体介导的卵巢及早期胚胎的天然抗病毒反应。 selleckchem 材料与方法：免疫组化和Western blotting方法用于蛋白的定位与定量分析。Real-time RT-PCR用于分析mRNA表达水平分析。ELISA方法用来分析细胞因子的浓度。分离小鼠颗粒细胞、卵细胞、卵黄囊细胞,通过转染Poly(I:C)模拟病毒感染,分析细胞的天然抗病毒反应。

结果：病毒RNA模式识别受体TLR3、MDA5、RIG-1在卵巢颗粒细胞与间质细胞中表达。Poly(I:C)可以诱导颗粒细胞的天然抗病毒反应,包括上调TNF-α、IL-6、 IFN-α、IFN-β等炎症因子,以及抗病毒蛋白ISG15、OAS1、Mx1的表达。抑制TLR3、MDA5、RIG-I中任一个受体表达显著地降低了上述反应。颗粒细胞的抗病毒反应干扰雌激素的合成。而且MDA5、RIG-I表达于卵母细胞及成熟的卵细胞,Poly(I:C)诱导卵细胞抗病毒蛋白ISG15、OAS1表达上调。在胚胎发育早期,TLR3、MDA5、RIG-I受体特异表达于卵黄囊细胞,Poly(I:C)可诱导卵黄囊细胞产生天然抗病毒反应。Poly(I:C)诱导的天然抗病毒反应需要TLR3、MDA5、RIG-I受体介导的核转录因子κB(NF-κB)与干扰素调节因子3(IRF3)的活化。 Apoptosis Compound Library cell assay 结论：卵巢颗粒细胞与卵细胞表达TLR3、MDA5、RIG-I受体,并可介导天然抗病毒反应,卵巢的抗病毒反应干扰其自身的激素分泌功能。在早期胚胎发育过程,天然抗病毒机制主要存在于卵黄囊中。结果表明,卵巢颗粒细胞、卵细胞及胚胎卵黄囊中具有天然抗病毒活性。
目的

胃癌是近发病率排名第四的恶性肿瘤,接近2/3的胃癌发生在发展中国家,而其中有42%发生在中国。尽管在胃癌的诊断方法及治疗手段上已取得不少进展,但在癌症相关死亡率排名中,胃癌仍高居世界第二。化疗是目前应用于胃癌的临床治疗方案中非常重要的一个手段,对于术后残留癌细胞的清除、防止复发、改善预后等方面都具有积极作用。但是越来越多的临床证据表明,目前常用于一线治疗的多种药物及多种给药方案的总体疗效评价不甚理想,为进一步探询内在原因及探索新的治疗方案提出要求。WD重复区域62(WDR62)是最近发现的和中心体相关的基因,它有32个外显子,1个CpG岛和poly(A)尾。WDR62位于人类染色体19q13.12区,而且靠近CEBPG,GPI和UBA2基因的功能区,参与细胞循环与增殖等生物学过程。这些基因都已被证实在DNA复制及细胞周期中发挥极其重要的作用。WDR62蛋白有13个WD重复区域,在C末端有6个可以被丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化激活的位点,具有调控细胞信号通路、转录、有丝分裂和细胞凋亡的功能。当有丝分裂发生时,WDR62的内源性表达大量聚集在分裂细胞的纺锤体极,而不是在细胞核周围,提示我们WDR62在肿瘤细胞的增殖过程中发挥着关键作用,但WDR62在人类恶性肿瘤中的作用仍然未知。本研究的目的即在于明确WDR62在人类胃癌发展与预后中的作用。 方法 采集372例临床胃癌患者的癌组织及癌旁胃粘膜标本,分别进行苏木素伊红(HE)染色剂免疫组织化学染色。请两名有经验的病理诊断学家分别独立阅片确认胃腺癌的诊断。用实时荧光定量PCR及Western

Blotting法检测各组织标本中WDR62的表达水平。采集胃癌病例的临床病理学特征,收集随访资料,建立Cox回归模型分析WDR62表达水平、临床病理学特征与预后之间的关系。细胞培养8株人类胃癌细胞系(AGS, CDK and cancer SGC7901, BGC-823, MGC-803, HGC-27, SGC7901/VCR, SGC7901/DDP和SGC7901/ADM),用定量RT-PCR及Western blotting检测WDR62的表达水平。构建慢病毒质粒载体分别转染BGC-823和多重耐药株SGC7901/VCR细胞,研究沉默WDR62对细胞生殖、侵袭转移能力、细胞周期、凋亡发生、细胞活力、化疗敏感性等的影响,并检测WDR62, cyclin B, CDK1, caspase3及Akt、 ERK等其他若干信号转导分子的mRNA及蛋白表达水平。分别用慢病毒LV-shRNA-Control and LV-shRNA-WDR62转染的BGC-823和SGC7901/VCR细胞行裸鼠皮下成瘤试验,31天后,处死裸鼠,取出肿瘤测量其大小及重量,并行HE染色,IHC染色WDR62及Ki67。 结果 用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测372例胃癌组织标本及其癌旁胃粘膜组织标本(NT)中WDR62mRNA表达水平发现,胃癌组织中的WDR62mRNA表达水平显著高于癌旁组织(0.0065±0.0016V.S.0.0027±0.0009, p<0.